猪的稀释精液配制技术

养猪的人

随着养猪生产的发展和产业化进程的推进。人们对猪人工授精重要性的认识越来越深刻，在现代养猪生产和育种工作中，人工授精正成为一种非常重要的生产途径。近年来，由于大规模、高度集约化现代化畜牧业的出现，更进一步促进了人工授精的应用和发展。我国猪的精液稀释、保存与应用，在20世纪70～80年代已在全国各省区推广应用，并取得了良好的效果。现就猪人工授精的冷冻精液稀释配制技术简介如下，供广大同仁参考。
1 精液品质的检查
采集精液后，迅速置于30℃左右的恒温水浴中，然后取样进行综合分析，确定精子是否可以用于保存或输精。
1.1 感官检查
①颜色：公猪精液正常的颜色为乳白色或淡灰白色，若为其它颜色或精液中带有血液，均为不正常颜色，说明公猪的生殖道有炎症或损伤；如果精液呈淡绿色，是混有脓汁；呈粉红色，是混有血液；呈黄色，是混有尿液。颜色异常的精液应弃之不用。
②气味：正常的精液一般无味或略带腥味。如果精液的腥味很浓，或有臭味和尿味，属不正常精液，应弃之不用。
③射精量：猪正常的射精量，我国的地方品种猪为150～300mL/次，外国引入品种为250～400mL/次。如果公猪的射精量过少，说明公猪利用过度或饲养管理不当，应采取措施，力求在短期内恢复其正常的射精量。
1.2 镜检
①精子的活力：精子的活力是指原精液在37℃下呈直线运动的精子占全部精子总数的百分率。由于其受环境因素的影响很大，为了得到客观、准确的结果，在检查精子活力时应在恒温 （37～38℃）条件下进行，避免阳光直接照射到精液样品上，并远离易挥发的化学物质或消毒剂。为了保证获得较高的受胎率，用于输精的精液精子活力不得低于0.4，冻精解冻后的精子活力不低于0.3。
②精子的密度：正常精液的精子密度平均为2.5亿（1亿～3亿之间），从镜检中看到精子密度高的精液往往呈云雾状。现在大都借助于分光光度计、电脑处理机、数字显示或打印机等结合进行检查。
2 精液的稀释和保存
精液经检查合格后，尚需经过稀释、分装、保存和运输等过程，最后用于输精。
2.1 猪精液稀释液的配制
常用的猪精液稀释液种类有很多，其配方有以下几种：
①奶粉稀释液：奶粉9g，蒸馏水100mL。
②葡柠稀释液：葡萄糖5g、柠檬酸钠0.5g、蒸馏水100mL。
③“卡辅”稀释液：葡萄糖6g、柠檬酸钠0.35g、碳酸氢钠0.12g、乙二胺四乙酸钠0.37g、青霉素3万Iu、链霉素10万Iu、蒸馏水100mL。
④氨卵液：氨基乙酸3g、蒸馏水100mL配成基础液，基础液70mL加卵黄30mL。
⑤葡柠乙液：葡萄糖5g、柠檬酸钠0.3g、乙二胺四乙酸0.1g、蒸馏水100mL。
⑥葡柠碳乙卵液：葡萄糖5.1g、柠檬酸钠0.18g、碳酸氢钠0.05g、乙二胺四乙酸0.16g、蒸馏水100mL，配成基础液，基础液97mL加卵黄3mL。
以上几种稀释液除“卡辅”外，抗生素的用量为青霉素1000lu/mL、双氢链霉素1000μg/mL。
2.2 国外常用的3种稀释液的配制
①BL-1液（美国）：葡萄糖2.9%、柠檬酸钠1%、碳酸氢钠0.2%、氯化钾0.03%、青霉素1000Iu/mL、双氢链霉素0.01%。
②IVT液（英国）：葡萄糖0.3g、柠檬酸钠2g、碳酸氢钠0.21g、氯化钾0.04g、氨苯磺酸0.3g、蒸馏水100mL，混合后加热使之充分溶解，冷却后通入二氧化碳约20分钟，使pH达到6.5。
③奶粉-葡萄糖液（日本）：脱脂奶粉3.0g、葡萄糖9g、碳酸氢钠0.24g、α-氨基-对甲苯磺酰胺盐酸盐0.2g、磺胺甲基嘧啶钠0.4g、灭菌蒸馏水200mL。
2.3 精液的稀释和稀释倍数
稀释之前需确定稀释的倍数。稀释倍数根据精液内精子的密度和稀释后每毫升精液应含的精子数来确定。猪精液经稀释后，要求每毫升含1亿个精子。如果密度没有测定，稀释倍数国内地方品种一般为0.5～1倍，引入品种为2～4倍。
精液稀释应在精液采出后尽快进行，而且精液与稀释液的温度必须调整到一致，一般是将精液与稀释液置于同一温度（30℃）中进行稀释。
2.4 精液的保存
为了延长精子的存活时间，扩大精液的使用范围，便于长途运输，稀释后的精液需进行保存。
①常温保存：在15～20℃室温条件下，利用稀释液的弱酸性环境来抑制精子的活动，减少能耗。而稀释液中的抗菌素类药物可以抑制微生物繁衍，减少对精子的危害，使精液得以保存，保存时间为3天左右。
②低温保存：在0～5℃条件下，精子的活力被抑制，降低代谢水平，减少能耗，精子的存活时间得以延长。在低温保存下，10～0℃温度范围对精子是一个危险的温度范围区，如果精液从常温状态迅速降至0℃，精子就会发生不可逆的冷休克现象。所以精液在低温保存之前，需经预冷平衡。其具体做法为：每分钟降温0.2℃，用1～2小时完成降温全过程。此外，在稀释液内添加卵黄、奶类等物质也可以提高精子的抗冷能力。
在农村无冰源条件下，可以采用以下方法制造冷源：
①将食盐40g溶于1500mL冷水中，加入氯化铵400g，装入广口保温瓶内，其温度可以降至2℃左右。如果想长期维持低温，每隔2天重新添加一次氯化铵。
②将尿素60g溶于100mL冷水中，可以降温至5℃。如果将其溶于冰水中，可以降温至-5℃。
③将贮精瓶包裹结扎盛于塑料袋内，扎好袋口。将贮精塑料袋放于竹筒或竹篮等容器中，再将容器吊沉于井底保存。