赭曲霉毒素快检

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1. 概要

赭曲霉毒素A主要是由赭曲霉（Aspergillus ochraceus）和纯绿青霉 (Penicillium viridicatum)产生的一种霉菌肾毒素，存在于粮食（小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等）、花生、蔬菜（豆类）等农作物上。赭曲霉毒素A主要侵害动物肝脏与肾脏，引起肾脏损伤，大量的毒素也可能引起动物的肠黏膜炎症和坏死。产生赭曲霉毒素A的霉菌（如赭曲霉、纯绿青霉等）普遍存在，赭曲霉毒素A的污染可以发生在植物的生长、收获、加工、贮藏和运输等过程中。中国规定谷物、豆类及其制品中赭曲霉毒素A不得超过5μg/kg，欧盟规定谷物、豆类及其制品中赭曲霉毒素A不得超过,3μg/kg。iCheck®赭曲霉毒素A定量快检卡可以快速定量的检测小麦及其制品中0-20ppb的赭曲霉毒素A含量。

2. 赭曲霉毒素A定量快检卡测试包组成

1) iCheck®赭曲霉毒素A快检卡（25个）

2) OTA微孔（25个）

3) 稀释缓冲液CSB-1（5mL）

4) 200μL吸头（50个）

5) OTA电子标定卡（1个）

6) 操作说明书

3. 试验需要的设备

1）200μL 、1000μL微量移液器（各1支）

2）iCheck® 定量快检仪(带零点校正片)

3）多用途旋转摇床       4）计时器                      5) 电子称               6）纯水，或二次蒸馏水        7）提取液：甲醇+水（70+30）   

8）漏斗                 9）定性滤纸  

10）50mL离心管

4. 试验前的准备与仪器标定

1）使用前将快检卡、缓冲液和待检样品恢复至室温30分钟。

2）设备零点校正：将零点校正片插入定量快检仪测定室，点击“零点校正”即可。

3）设备标定：将OTA电子标定卡插入定量快检仪卡槽中，点击读取“进行标定”即可。测定时，不得将电子标定卡取出。

4）根据测定样品数量，打开包装袋，取出快检卡和OTA微孔，将OTA微孔置于微孔架上。

5. 样品处理与检测

1）称取5.0g粉碎(20目过筛)的玉米（或者大米）样品于50mL离心管中，加入25.0mL 70%甲醇水提取液，置于旋转摇床上旋转振荡提取5分钟(或用高速均质器均质1分钟，或用手剧烈振荡3分钟)。

2）用定性滤纸过滤，取120μL 稀释缓冲液CSB-1于OTA微孔中，加入滤液30μL，用移液器吸打5次混匀，取100μL加入到快检卡样品孔中。

3）37℃（±2℃）反应10分钟后，立即将快检卡放入定量快检仪中，点击“分析”读数，即为样品实际浓度。

6. 结果判定

1）检测范围：0-20ppb，定量限2.5ppb。

2）此检测卡为定量快检卡，若控制线（C）无红线出现，表明快检卡失效。

3）如果测定值大于内部或标准限量值的80%（如大于4 ppb），请再重新测定一次。如果还是大于上述值，请用仪器法进行确认分析。

4）如果测定值大于20ppb，请将样品提取液的滤液用70%甲醇水进行稀释，最后定量快检仪

的读数乘以稀释倍数，即为样品实际浓度。

7. 注意事项

1) 快检卡在保质期内一次性使用。2-8℃冰箱保存使用前应平衡至室温后再开袋使用。

2) 谨防快检卡受潮，铝箔包装袋受损或快检卡受潮后，检测卡不要使用。

3) 尽量不要触摸快检卡中央的白色膜。

4) 所有温育过程应避免阳光直射。

5) 铝箔包装袋中的小包是干燥剂，不可误服。

6) 超过保质期不可使用。