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胶原蛋白作为一种重要的天然蛋白质资源,无论在生物医学、食品保健还是在化妆品、纺织行业中的应用都十分广泛,综合利用的研究进展速度很快,其良好的生物相容性、生物可降解性,使它在食品工业中具有广泛的应用前景和发展 [11]。依靠微生物产生胶原蛋白酶,再制备胶原蛋白是一个发展迅速的胶原蛋白获得方式。
胶原酶来源广泛,多种微生物与动物的许多组织细胞都可产生胶原酶。国外对胶原酶的研究起于上个世纪60年代,最先在蝌蚪外殖体组织中发现含锌的金属酶(Gross and Lapiere, 1962),后来在溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),无色菌(Achromobacter ),褐藻弧菌(Vibrio alginolyticus),产气荚膜梭(Clostridium perfringens),枯草杆菌(Bacillus subtilis),白色链霉菌(Streptomyces albidoflavus),高温放线菌(Thermoactinomyces)等菌中得到,并在蛇毒中也得到了胶原蛋白酶[12-14],但是许多非食品来源的胶原蛋白酶不能排除病毒隐患,目前大多从食品中研究胶原蛋白酶,如鱼子酱中,日本鲭鱼(Scomber japonicus)中等,据报道每年约收获一亿吨鱼,但只有30%被制成了鱼肉产品,50%以上被浪费了[15];我国是制革大国,具有丰富的皮胶原资源,胶原酶可以专一的水解皮胶原,而不需要对皮胶原进行热变性和酸碱处理,就可制备出具有高生物活性的胶原蛋白,对提高动物皮及制革副产物(边角料残次皮)的应用有重要意义[16]。制革业是我国轻工业中的第一大出口创汇产业,然而又是我国仅次于造纸业的第二大有机物质污染源[17],我国每年约产生140多万吨的皮革固体废弃物,而在这些固体废弃物中,除少量的非胶原蛋白外,大约80%以上都是胶原蛋白构成的[18]。利用胶原蛋白酶可以有效的对制革业产生的污染和鱼胶原的浪费进行合理的处理,有很大的社会和市场需求。
胶原酶现已广泛应用在医学领域 ,用于治疗椎间盘突出、创伤修复、治疗血栓、治疗脓疮等,特别是近年秦静[19]在CT引导下注射胶原蛋白酶治疗腰椎间盘突出症,不但大大减少了副反应,还提高了注射的准确性,这说明了在胶原蛋白酶的应用领域里还有很大的发展空间。
蛋白酶虽然广泛存在于微生物中,但工业上主要采用芽孢杆菌属的几个种,如地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌等[10] 本实验分离到的就是一株短小芽孢杆菌。对本实验中所分离到的COL-J菌株及其它几株能产生胶原蛋白酶,且初步鉴定效果良好的菌株本实验室正在进行培养条件的优化,以便可以获得更高的酶活力可有更好的应用前景,并可以在此基础上,进一步对菌株进行胶原蛋白酶的分离纯化以及基因的克隆和表达工作,以期最终实现该酶的工业化生产应用。
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