禽流感的相关知识摘要－－供学习讨论用

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    禽流感（AI）是由A型流感病毒(Avian influenza Virus type A)中的任何一型引起的一种感染综合征，又称真性鸡瘟、欧洲鸡瘟。

     禽流感（Avian Influenza, AI）是由A型流感病毒引起的家禽和野禽的一种烈性传染病，给养禽业造成巨大损失，我国农业部和国际兽医局都将其定为A类传染病。以往认为禽流感病毒（Avian Influenza Virus, AIV）对人群无致病力，但1997年香港报道了首例因感染H5N1亚型AIV致死人事件后，近年及最近又有多例人感染AIV发病，甚至死亡的报道。今年更是严重！由此可以看出，禽流感也具有重要的公共卫生意义。

Ａ型流感病毒属正粘病毒科（Ｏrthomyxoviridae family）、正粘病毒属中的病毒。该病毒的核酸型为单股ＲＮＡ，病毒粒子一般为球形，直径为８０～１２０nm，但也常有同样直径的丝状形式，长短不一。病毒粒子表面有长１０～１２nm的密集钉状物或纤突覆盖，病毒囊膜内有螺旋形核衣壳。两种不同形状的表面钉状物是血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)。HA和NA是病毒表面的主要糖蛋白，具有种(亚型)的特异性和多变性，在病毒感染过程中起着重要作用。HA是决定病毒致病性的主要抗原成分，能诱发感染宿主产生具有保护作用的中和抗体，而NA诱发的对应抗体无病毒中和作用，但可减少病毒增殖和改变病程。流感病毒的基因组极易发生变异，其中以编码HA的基因的突变率最高，次为NA基因。迄今已知有16种HA和10种NA，不同的HA和NA之间可能发生不同形式的随机组合，从而构成许许多多不同亚型。据报道现已发现的流感病毒亚型至少有80多种，其中绝大多数属非致病性或低致病性，高致病性亚型主要是含H5和H7的毒株。所有毒株均易在鸡胚以及鸡和猴的肾组织培养中生长，有些毒株也能在家兔、公牛和人的细胞培养中生长。在组织培养中能引起血球吸附，并常产生病变。大多数毒株能在鸡胚成纤维细胞培养中产生蚀斑。有些毒株在鸡、鸽或人的细胞培养中培养之后，对鸡的毒力减弱。

    病毒子在不同基质中的密度为1.19～1.25g/ml。通常在56℃经30min灭活；某些毒株需要50min才能灭活；对脂溶剂敏感。加入鱼精蛋白、明矾、磷酸钙在-5℃用25%～35%甲醇处理使其沉淀后，仍保持活性。甲醛可破坏病毒的活性；肥皂、去污剂和氧化剂也能破坏其活性。冻干后在-70℃可存活两年。感染的组织置50%甘油盐水中在0℃可保存活性数月。在干燥的灰尘中可保存活性14d。

流行病学

流感在家禽中以鸡和火鸡的易感性最高，其次是珍珠鸡、野鸡和孔雀。鸭、鹅、鸽、鹧鸪也能感染。

    感染禽从呼吸道、结膜和粪便中排出病毒。因此，可能的传播方式有感染禽和易感禽的直接接触和包括气溶胶或暴露于病毒污染的间接接触两种。因为感染禽能从粪便中排出大量病毒，所以，被病毒污染的任何物品，如鸟粪和哺乳动物、饲料、水、设备、物资、笼具、衣物、运输车辆和昆虫等，都易传播疾病。本病一年四季均能发生，但冬春季节多发，夏秋季节零星发生。气候突变、冷刺激，饲料中营养物质缺乏均能促进该病的发生。本病能否垂直传播，现在还没有充分的证据证实，但当母鸡感染后，鸡蛋的内部和表面可存有病毒。人工感染母鸡，在感染后3~4d几乎所产的全部鸡蛋都含有病毒。

症状

该病的潜伏期较短，一般为4～5d。因感染禽的品种、日龄、性别、环境因素、病毒的毒力不同，病禽的症状各异，轻重不一。
    最急性型：由高致病力流感病毒引起，病禽不出现前驱症状，发病后急剧死亡，死亡率可达90%～100%。
    急性型：为目前世界上常见的一种病型。病禽表现为突然发病，体温升高，可达42℃以上。精神沉郁，肿头，眼睑周围浮肿，肉冠和肉垂肿胀、出血甚至坏死，鸡冠发紫。采食量急剧下降。病禽呼吸困难、咳嗽、打喷嚏，张口呼吸，突然尖叫。眼肿胀流泪，初期流浆液性带泡沫的眼泪，后期流黄白色脓性分泌物，眼睑肿胀，两眼突出，肉髯增厚变硬，向两侧开张，呈“金鱼头”状。也有的出现抽搐，头颈后扭，运动失调，瘫痪等神经症状。

病变

最急性死亡的病鸡常无眼观变化。急性者可见头部和颜面浮肿，鸡冠、肉髯肿大达３倍以上；皮下有黄色胶样浸润、出血，胸、腹部脂肪有紫红色出血斑；心包积水，心外膜有点状或条纹状坏死，心肌软化;病鸡腿部肌肉出血，有出血点或出血斑。消化道变化表现为腺胃乳头水肿、出血，肌胃角质层下出血，肌胃与腺胃交界处呈带状或环状出血；十二指肠、盲肠扁桃体、泄殖腔充血、出血；肝、脾、肾脏瘀血肿大，有白色小块坏死；呼吸道有大量炎性分泌物或黄白色干酪样坏死；胸腺萎缩，有程度不同的点、斑状出血；法氏囊萎缩或呈黄色水肿，有充血、出血；母鸡卵泡充血、出血，卵黄液变稀薄；严重者卵泡破裂，卵黄散落到腹腔中，形成卵黄性腹膜炎，腹腔中充满稀薄的卵黄。输卵管水肿、充血，内有浆液性、粘液性或干酪样物质。公鸡睾丸变性坏死。

诊断

1．病毒分离与鉴定：通常在刚有症状表现的感染初期或发病急性期采集病料，而感染后期因机体已形成大量抗体，往往不易分离到病毒。病料可以用活禽的气管和泄殖腔拭子或死禽的肝脏、肺脏、胰脏、脑等脏器，病料研磨后加抗生素或用细菌过滤器除菌，接种9—11天龄SPF鸡胚尿囊腔。鸡胚于35—37℃培养2—4天后，弃去24小时内死亡鸡胚，收获其余鸡胚的尿囊液和绒毛尿囊膜。然后用尿囊液作鸡红血球凝集试验（HA），如有血凝活性，则用鸡新城疫阳性血清作鸡红血球凝集抑制试验（HI），如HI试验呈阴性，再用绒毛尿囊膜制成抗原后与标准的A型流感阳性血清做琼脂扩散（AGP）试验，出现阳性结果时方能确定为AIV。接着可通过针对不同血凝素和神经氨酸酶的单克隆抗体鉴定病毒的HA和NA亚型。禽流感病毒的分离与鉴定过程中常常会碰到鸡新城疫病毒的干扰，这时可用病毒中和试验或犬肾细胞（MDCK细胞）传代的方法纯化病料，其中尤以后者的效果最好。
    2．血清学诊断：目前，国际兽医局推荐使用的两种标准方法是AGP和HI试验。前者主要利用A型流感病毒的核蛋白抗原检查禽只血清中相应的抗体。其优点是简便快捷、特异性强，且不受病毒亚型的限制；但它的灵敏性较低，尤其不同来源的标准抗原因纯度等方面的不同，会在检测结果上表现出一定差异。AGP试验的操作方法有多种，一般常采用双向双扩散试验，即用已知抗原、阳性血清和待检血清在琼脂凝胶中进行免疫双扩散，室温下作用24小时，当已知扩原和阳性血清间出现明显沉淀线，扩原和待检血清间也出现沉淀线且与阳性血清沉淀线相连，表明待检血清中有相应抗体。
* g; e6 Y4 k. p. A$ n! n    HI试验主要用来鉴定流感病毒的HA亚型，或直接检测某一特定亚型流感病毒的感染。由于不只是流感病毒才有血凝活性，而且流感病毒的表面抗体很不稳定，所以对HI试验的结果要仔细分析和验证，慎重得出结论。另外，禽类血清中含有非特异性的血凝抑制因子（抑制素）能与红细胞表面受体竞争性地与病毒表面的HA发生凝集反应。故做HI试验时要先除去这些非特异性的抑制素，常用的方法有受体破坏酶（RDE）即霍乱滤液处理法和高碘酸钠法。

在血清学试验中，应认识到不同禽类种间的免疫应答有很大差异。例如AGP试验对检测鸡和火鸡感染AI的效果要好于鸭和鹅。另外，采集急性期和康复期（发病后２－４周）的禽只血清作检测很重要，尤其是比较二者的HI效价变化情况具有诊断意义。
9 H6 K  L% t7 U4 O0 Y5 W    3．鉴别诊断： AI在临诊上与鸡新城疫、传染性喉气管炎和肿头综合症等疾病有相似之处，易引起诊断错误。一般来说鸡新城疫没有头部、眼部肿胀，冠和肉髯一般也不会有出血斑，跖部的鳞片下也不会出血，剖检时一般不会有头颈部皮下胶样浸润，胰腺坏死等病变。而传染性喉气管炎的症状和病变主要见于喉头气管，很少有消化道病变如腺胃、肌胃出血和胰腺坏死等。此外，肿头综合症也可见到眼眶及眶下窦肿胀、扭颈等神经症状，但发病率和死亡率较低，没有AI的其它症状和病变。当然，要将这些疾病准确区分开来还是必须依靠实验室诊断。

防治

1.处理 该病属法定的畜禽一类传染病，危害极大，故一旦爆发，确诊后应坚决彻底销毁疫点的禽只及有关物品，执行严格的封锁、隔离和无害化处理措施。严禁外来人员及车辆进入疫区，禽群处理后，禽场要全面清扫、清洗、消毒、空舍至少3个月。目前国外也采用“冷处理”的方法，即在严格隔离的条件下，对症治疗，以减少损失。对症治疗可采用以下方法。
    (1)抗病毒药物如病毒唑或盐酸吗啉胍(病毒灵0.01%～0.05%饮水，连用5～7d，或盐酸金刚烷胺或盐酸金刚乙胺0.05%～0.08%拌料连用5～7d。也可用板蓝根2g/只•日，大青叶3g/只•日，粉碎后拌料，配合防制。
    (2)抗菌药物如环丙沙星或培福沙星等0.005%饮水，连用5～7d，以防止大肠杆菌、支原体等继发感染与混合感染。
    2.预防 禽流感发病急，死亡快，一旦发生损失较大，应重视对该病的预防。
( J! H% @7 _5 M" B    (1)加强饲养管理 严格执行生物安全措施，加强禽场的防疫管理，禽场门口要设消毒池，谢绝参观，严禁外人进入禽舍，工作人员出入要更换消毒过的胶靴、工作服，用具、器材、车辆要定时消毒。禽舍的消毒可选用二氯异氰尿酸钠或二氧化氯以强力喷雾器作喷洒消毒。粪便、垫料及各种污物要集中作无害化处理；消灭禽场的蝇蛆、老鼠、野鸟等各种传播媒介。建立严格的检疫制度，种蛋、雏禽等产品的调入，要经过兽医检疫；新进的雏禽应隔离饲养一定时期，确定无病者方可入群饲养；严禁从疫区或可疑地区引进家禽或禽制品。加强饲养管理，避免寒冷、长途运输、拥挤、通风不良等因素的影响，增强家禽的抵抗力。

2)免疫预防 禽流感病毒的血清型多且易发生变异，给疫苗的研制带来很大困难。目前预防禽流感还没有理想的疫苗，现有的疫苗有弱毒疫苗、灭活油乳剂疫苗和病毒载体疫苗，接种疫苗后能产生一定的保护作用，但使用弱毒疫苗具有突变为高致病性禽流感病毒的危险，而灭活疫苗的免疫保护效果差、成果高，而且这些疫苗的应用还会影响禽流感疫情监测，因此不推荐使用疫苗。目前尚在研制中的疫苗还有DNA疫苗，它是将血凝素抗原基因g隆于DNA表达载体上，给动物注射后，DNA在体细胞内表达出抗原蛋白，从而产生免疫效果，这是一种安全且易长期保存的疫苗。

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    感谢陈总分享

随遇而不安

AI在临诊上与鸡新城疫、传染性喉气管炎和肿头综合症等疾病有相似之处，易引起诊断错误。