不同水平硒酵母对奶牛抗氧化能力的影响

apple12151007

　　不同水平硒酵母对奶牛抗氧化能力的影响
　　摘 要：本试验选取8头体况、奶产量、泌乳天数相近的奶牛，分为四组分别添加4种不同的预混料：①对照组不添加硒酵母而添加亚硒酸钠，0.3mgSe/kg日粮，②～④添加硒酵母，硒水平分别为：②0.3mg/kg，③0.45mg/kg，④0.6mg/kg，试验结束后，采集血样同时制备血清，用于检测硒含量和相关抗氧化能力指标。结果表明：与亚硒酸钠相比，添加酵母硒可以提高全血硒含量及血清中总抗氧化能力(T-AOC)，谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力，降低丙二醛(MDA)含量;试验中以酵母硒0.3 mgSe/kgDM 组的奶牛上述指标有显著的改善。
　　关键词：硒酵母 添加量 消化率
　　目前硒对动物机体的功效已被人们所熟悉，并且还发现高于国际标准建议的动物日粮中硒添加水平能够带来较好的效果。当前的动物预混料中普遍使用的是廉价的亚硒酸钠作为硒源，它不仅毒性强用量不易掌握而且生物利用率低，会对环境造成污染。有机硒低毒高效的特点使它正在国际上逐步取代亚硒酸钠作为预混料的硒源。硒酵母与其他有机硒相比有价格优势推广前景广阔。目前已经知道有机硒可以提高机体的免疫和抗氧化能力，但关于硒酵母对奶牛抗氧化能力影响的报道还很少。本试验研究了不同硒酵母添加量对奶牛抗氧化能力的影响，为硒酵母在奶牛上的应用和对奶牛营养调控提供参考。
　　1 试验材料与方法
　　1.1 试验动物
　　1.1.1选取宜昌京都奶牛场体况、奶产量、泌乳天数相近的8头奶牛。
　　1.1.2分组与处理：将8头奶牛随机分为四组，采用4×4拉丁方设计：①对照组不添加硒酵母而添加亚硒酸钠，0.3mgSe/kg日粮，处理组添加硒酵母，水平如下②0.3mgSe/kg，③0.45mgSe/kg，④0.6mgSe/kg。预饲期10天，正饲5天。
　　所用硒酵母为安琪酵母提供，每克酵母含硒量不低于1mg。
　　1.1.3 饲养管理
　　每天饲喂3次，先粗后精，精料一次2.8kg，挤3次奶，日粮成分见表1，自由采食草料和饮水。
　　表1 奶牛日粮成分

原料	含量（%）	原料	含量（%）
玉米	44	棉粕	9
大麦	12	啤酒糟	7
麸皮	10	预混料	5
菜粕	8	贝壳粉	5

　　1.2测定项目与方法
　　血样：正饲最后一天，采集血样40ml，其中20ml抗凝处理测全血硒含量，另20ml离心制备血清。
　　检测指标：血硒，血清中总抗氧化能力(T-AOC)，超氧化物歧化酶(SOD)，丙二醛(MDA)，谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)活力。试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。
　　1.3 数据处理
　　采用SPSS13.0进行单因素方差分析，并进行验后多重比较。
　　2 结果与分析
　　2. 1 不同水平酵母硒对全血硒含量的影响
　　由表2可以看出，随着酵母硒添加量的提高，全血硒含量呈上升趋势，添加酵母硒0.45Se/kgDM和0.6mgSe/kgDM比添加亚硒酸钠0.3Se/kgDM分别提高26.67%和40%(P<0.01)，在相同水平添加量下酵母硒组比亚硒酸钠组的全血硒含量高20%(P<0.05)。这说明奶牛机体可以吸收较高水平的酵母硒，其利用率比亚硒酸钠高。
　　表2 不同水平酵母硒下全血硒、血清T-AOC、SOD、MDA、GSH-PX含量

	全血硒含量(mg/L)	GSH-PX	T-AOC	SOD(U/ml)	MDA(nmol/ml)
亚硒酸钠0.3(mg/kg)	0.15±0.02Bc	110.70±4.82C	3.00±0.08B	167.64±16.66b	10.59±1.85a
酵母硒 0.3(mg/kg)	0.18±0.02ABb	159.54±13.49Aa	4.13±0.10A	193.31±16.38a	7.85±1.37b
酵母硒 0.45(mg/kg)	0.19±0.02Aab	143.71±11.01ABbc	4.02±0.71A	181.30±14.59a	9.07±1.29ab
酵母硒 0.6(mg/kg)	0.21±0.02Aa	132.76±2.64Bbc	3.83±0.18A	177.75±8.81a	10.23±0.78a

　　注：同列肩注不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)
　　2.2 不同水平酵母硒对血清GSH-PX的影响
　　本试验添加酵母硒后，各组奶牛血清GSH-PX极显著高于对照组(P<0.01)，试验各组分别比对照组高44.12%，29.82%，19.93%;0.3水平的酵母硒组高出0.6水平20.17%(P<0.01)。随着添加量的提高血清GSH-PX呈下降的趋势。
　　2.3 不同水平酵母硒对血清总抗氧化能力的影响
　　添加酵母硒后，奶牛血清总抗氧化能力极显著高于对照组(P<0.01)，随着酵母硒添加量的提高分别比对照组高37.67%，34.00%，27.67%，而酵母硒组间并无差异，但随着添加量的提高总抗氧化能力有下降的趋势。
　　2.4 不同水平酵母硒对血清超氧化物歧化酶的影响
　　由表16可以看出血清SOD酶活的变化趋势与T-AOC一致，并且与GSH-Px显著正相关(r=0.987),与丙二醛显著负相关(r=-0.955)。酵母硒组间SOD酶活并无差异，随着酵母硒添加量的提高SOD分别比对照组显著提高15.31%，8.15%，6.03%(P<0.05)。
　　2.5 不同水平酵母硒对血清丙二醛的影响
　　添加酵母硒后，MDA比对照组降低了，这与黄志坚(2004)报道有机硒能够降低MDA的结果一致。其中0.3 mg/kg水平的酵母硒和对照组有显著差异，下降了25.87%(P<0.05);说明0.3 mg/kg酵母硒水平可以有效降低不饱和脂肪酸脂质过氧化反应。但随着添加量的提高血清中丙二醛含量有上升的趋势，其中0.6水平比0.3水平显著提高30.32%(P<0.05)。
　　3 讨论
　　硒参与GSH-Px的合成,以促进过氧化氢或脂类过氧化物转化成水和无害的酒精,防止脂类化合物的过氧化反应，保护细胞膜不受过氧化物的侵害,以维持细胞的正常结构和功能。所以人们常用GSH-Px酶活的高低作为硒在体内发挥生物活性的指示剂(Surai,2006b)。Gunter(2003)就曾报道过添加相同水平的酵母比亚硒酸钠可以显著提高奶牛全血硒含量和GSH-Px的活性。本试验无机硒——亚硒酸钠添加组血硒达到0.15mg/L，已在GSH-Px发挥生物活性的范围内(60-150ng/ml) (Gunter,2003),添加酵母硒后血硒显著增加达到0.18-0.21mg/L, 这与Nicholson(1991)Johansson(1990)报道的与无机硒相比，给反刍动物饲喂有机硒(酵母硒)能提高血液和组织中的硒浓度和提高GSH-PX的活性一致。另外Puls(1989)报道血硒在160-1200ng/ml时, 机体的GSH-Px活性最佳而且免疫功能也处于最佳状态。由此可见添加酵母硒可以使奶牛机体处于最佳状态。
　　机体抗氧化的防御体系有酶促和非酶促两个。酶促体系中许多酶以微量元素为活性中心，如GSH-Px、SOD、过氧化氢酶(CAT)等，非酶促体系则包括括维生素E、维生素C、β-胡萝卜素等。因此，T-AOC与机体内的多种因素有关。机体通过酶系统和非酶系统产生氧自由基，攻击生物细胞膜中的不饱和脂肪酸引发脂质过氧化作用形成脂质过氧化物，如醛基(丙二醛)、酮基、羟基等,所以丙二醛的量可以反映机体内脂质过氧化的程度，间接反映细胞损伤程度。从本试验可以看出,酵母硒0.3水平添加量的奶牛整体抗氧化能力最好,该能力随添加量的提高呈下降趋势。但Jukola(1996)曾报道如考虑硒对乳房炎的作用，全血中硒浓度应比0.18μg/ml高，或者血浆中硒达到约0.08μg/ml，本试验0.45水平下全血硒含量恰好高于0.18 μg/ml，并且综合上文Puls(1989)的报道及养分的表观消化率来看0.45水平应该效果最好，因此对于酵母硒0.45添加量下，全血硒含量在机体最佳状态范围内，而测定血清中抗氧化能力反而下降这一现象，还有待进一步研究。
　　4 结论
　　与亚硒酸钠相比，添加酵母硒可以提高全血硒含量及血清中总抗氧化能力(T-AOC)，谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力，降低丙二醛(MDA)含量;试验中以酵母硒0.3 mgSe/kgDM 组的奶牛上述指标有显著的改善。

刘广

知道的市场行情