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发表于 2010-10-10 20:00:36
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光合细菌培养条件
1、 营养条件
光合细菌细胞体构成元素主要有：碳、氢、氧、氮、磷、钾、钠、镁、钙、硫和一些微量元素等，它们也是所有生物细胞构成的主要物质。一般情况下，细胞鲜重：水占80％-90％、无机盐1％-1.5％、蛋白质7％-10％、脂肪1％-2％、糖类和其它有机物1％-1.5％。其中干细胞含碳45％-55％、氢5％-10％、氧20％-30％、氮5％-13％、磷3％-5％、其它矿物元素3％-5％。光合细菌的细胞壁具有半透性，能选择性地让一些营养元素按一定比例进内，在酶的作用下合成自己的细胞组织和裂新的个体。
营养元素的全面和搭配的合理,是营养条件的关键。根据这一要求,选用多种食品添加剂，科学配方，经特殊加工而成的"光合细菌培养基"（图2），基本符合光合细菌生长繁殖所需的营养要求，无毒无副作用，使用安全，固状结晶体便于包装和运输，而且有2年的保质期。用其生产菌液（每毫升含有30-50亿个活菌体），成本每500克仅0.2元，且现制现用，质量明优于市售同类产品。
光合细菌培养基（产品：Q/321081BJA001-2000,即光合细菌高效生长剂），是光合细菌生长繁殖所需各种营养元素的组合体。每种原料都能得以充分利用，最大限度地生产高浓度的菌液，因此，单位效价的光合细菌菌液生产成本低、质量好，这无论是对于用户、经销商还是厂家都有很大的益处，对在工农业生产中的推广和普及将产生深远的影响。
2.环境条件
有了营养全面的光合细菌培养基，才是内因，还不能培养出光合细菌菌液。还需有适宜光合细菌生长的环境条件，才能培养出优质的菌液。环境条件具体有以下几个方面：
（1）.培养介质：含菌量较低的清洁淡水、海水或加粗食盐的淡水。从经济、实用的角度考虑，地下水含菌量低，为最佳水源；清洁的地表水也可使用；含氯量较高的自来水应敞口放置两三天或调PH值至偏碱后使用；蒸馏水及纯净水固然很好，但成本太高，可用于提纯菌种。
（2）.酸碱度（PH）值：7.5-8.5最佳（适应范围6-10）。
（3）.水硬度：PH值中性时10度以下。即调节PH值至8.0左右时，培养介质中的乳白色沉淀物不宜过多。
（4）.温度：25℃-34℃最佳（适应范围15℃-40℃）。
（5）.光照度:3000LX-4000LX最佳。即每25千克菌液需用60瓦左右的电灯泡进行光照，当然，太阳光最好且无需成本。
（6）.透气性：密闭、敞口皆可培养，密闭效果更好。
（7）.容器：透明或白色容器；大规模培养可用土池、水泥池等，菌液深度30厘米以下为佳。
三、 增菌培养
光合细菌具有生长优势强，培养条件要求不高，施用对象对菌液纯度要求不十分严格等特点，因而适合用户在普通条件下生产。为了便于了解培养过程，掌握生产技术，现以样品为例介绍两种培养方法。若培养海水光合细菌，只需将介质换成海水或每25千克淡水加450克的粗食盐即可。
样品：1.光合细菌培养基(简称培养基)1袋（300克)。
2.菌种500克。浓度为每克30亿个活菌体，简称30亿级
1. 培养方法一：
本着实用和便于取材的宗旨,特备如下材料，供参考。
1、容器：
①清洁透明玻璃瓶或塑料瓶500毫升3只、1250毫升12只
②20升容积的塑料桶1只
③25升容积的塑料桶25只（装水用）
④50升容积的广口塑料桶1只
⑤小塑料漏斗1只
⑥玻璃杯1只
⑦5升塑料盆1只
2. 水50千克
3. 培养基1袋
4. 菌种（优质成品菌液500克）
5. 精密试纸1本（PH值范围5.5-9.0）
6. 氢氧化钠（烧碱）30克（不得用手触摸，以免烧伤皮肤）
7. 装满水插入温度指示瓶1只
8. 电灯炮3只（25瓦、40瓦、60瓦）
9. 清洁木棒2支（一支20厘米、另一支60厘米）
10. 称量工具：天平、秤
11. 纸箱2个（体积视具体情况而定）
步骤
第一次培养
1. 称取2千克的水倒入小塑料盆。
2. 用天平称取培养基12克，放入盆中，用木棒搅动，溶解制成培养基溶液。
3. 用试纸测出溶液的PH值。如是8.0左右为正好；如大于9.0，则需用盐酸下调至8.0（实际上在我国未发现有溶入培养基后，PH值还超过9.0的水源）；如小于7.5则用氢氧化钠溶液上调至8.0。设测出的PH值为6.5。需上调PH值。
4. 取100克水,倒入玻璃杯中，再取氢氧化钠2克加入，搅拌溶解后，制成氢氧化钠溶液。
5. 将培养基溶液搅动，加入氢氧化钠溶液10%左右，静置半分钟，用试纸测其PH值，如不能达到8.0，搅后再加10%，如此反复，直到PH值调至8.0为止。计算所用掉氢氧化钠溶液量,推算出实际用掉氢氧化钠的重量,作为以后制备氢氧化钠溶液的参照数值。上调PH值时，如出现少量白色絮状凝胶团，为正常现象，不影响培养效果。调好PH值的溶液即为培养液。
6. 从500克的菌种中取出400克，其余备用。将400克的菌种加入到培养液中，搅拌均匀，制成混合培养液，简称菌液。菌液的重量为：水2000克 +培养基12克（忽略不计）＋菌种400克＋氢氧化钠（忽略不计）＝2400克。菌种与培养液的比例为1：5。
7. 设菌液的密度为1克/毫升，则菌液的体积为2400毫升。取500毫升容积的清洁透明玻璃瓶5只，用漏斗将菌液装入瓶中，拧紧瓶塞。8. 对菌液进行连续地光照和保温培养。取纸箱一只，将菌液瓶和温度指示瓶贴近纸箱内壁放置，灯炮悬于箱内中部距瓶约10厘米处，保持温度25℃-34℃。注意观察温度的变化，如果温度过高，应更换小灯泡，仍过高，应打开箱散热，否则会蒸死细菌；如果温度低，应盖上箱盖增温，仍达不到要求，应更换大灯泡，否则会延长培养时间；室外温度适宜时，也可置于阳光下培养，谨防温度过高（45℃）！
9. 菌液的光照和温度都适宜后，细菌就进入了增殖阶段。每天颜色、气味、PH值、透光度和漂浮物等都有不同程度的变化，情况如下：
前3-4小时,菌种适应培养基,吸收水份和营养物质,细胞膨胀,将要裂殖,液体无明显变化。
48小时后，菌液的颜色更深，透光度更低，气味更浓，PH值也会有所升高，3-5天后升到9.0左右就不再升高了。
72小时后，菌液中的细菌浓度已很高，效价可达30亿级，颜色深红，有臭味，透光度低，PH值9.0左右，液底有少量淤泥状沉淀物。继续培养几天，细菌浓度还会继续升高，此时，可将菌液对照剩余菌种，如果浓度已达到或超过菌种，菌液即为成品菌液，培养成熟。10-15天后，菌液浓度达到最高值。
如上述，第一次培养结束后已得到2.4千克的成品菌液，可作为菌种再次培养扩大。
第二次培养
从上述得知现有菌种2.4千克（成品菌液），根据接种比例1：5的要求：
1.称取12千克水倒入20升塑料桶中，再用玻璃杯从中取出少许，用于溶解氢氧化钠。
2.称取培养基72克放入桶中，搅拌溶解制成培养基溶液。
3.将培养溶液PH值调节至8.0左右，制成培养液。根据"第一次培养"中实际用掉氢氧化钠的重量推算，称取此次的所需量，即第一次实际用量的6倍，将其倒入玻璃杯中，制成氢氧化钠溶液，用于调PH值。
4.将2.4千克菌种加入到培养液中，制成菌液，则菌液的总重量为：水12千克＋培养基72克（忽略不计）＋菌种2.4千克＋氢氧化钠（忽略不计）＝14.4千克，即体积为14.4升。
5.取清洁透明塑料瓶和玻璃瓶，容积为1250毫升的12只，用漏斗将菌液分别装满1250毫升的瓶中，拧紧瓶塞。
6.将菌液瓶等放入纸箱，按照第一次培养的方法进行培养。
几天后培养成熟，可得14.4千克成品菌液，作下次培养的菌种。
第三次培养
经过前两次培养后，菌种已达到14.4千克，还剩水约36千克、培养基216克。根据菌种与培养液的比例为1：5的标准，菌种已明显超过,菌种接入量的增多，有利于缩短培养时间，提高成品菌液质量。
1.将所剩的36千克水倒入广口塑料桶中。
2.将所剩的216克培养基加入桶内水中，溶解制成培养基溶液。
3.称取氢氧化钠，调节PH值至8.0，制成培养液。
4.将14.4千克菌种倒入培养液中，制成菌液。则菌液的重量为：36千克水＋216克培养基（忽略不计）＋14.4千克菌种＋氢氧化钠（忽略不计）=50.4千克。
5.将菌液50.4千克直接留在桶中培养。取电灯泡一只，悬于桶内液面上10-20厘米处；将温度计插入桶内菌液中；用塑料薄膜盖桶口，进行连续光照，并保持适当温度。如果温度过低，可将桶置于纸箱内增温。培养过程中适当搅动菌液，使之受光均匀，这样几天后，即可得到成熟的菌液约50千克。
样品培养完毕。
室外温度适宜，可将菌液直接置于阳光下培养。
此时，如果有足够的培养基和水，仍可按菌种与培养液1：5的比例，反复培养扩大。当达到所需用量时，留下一部分作菌种，其余施用。
操作要点：
①.PH值8.0左右；
②.菌种接入量不低于1：5；
③.温度25℃-34℃；
④.光照度3000LX-4000LX；
⑤.水硬度10度以下。
2.培养方法二（简便方法）：
材料
1.容器：
①.清洁透明玻璃瓶、塑料瓶500毫升3只，1250毫升6只
②.50千克容积的广口塑料桶一只
③.小塑料盆1只
④.小塑料漏斗1只
⑤.10升容积的塑料桶1只
2.水50千克
3.培养基1袋
4.菌种（成品菌液500克，30亿级）
5.装满水插入温度计的温度指示瓶1只
6.电灯泡3只（25瓦、40瓦、60瓦）
7.清洁木棒两2支（一支20厘米、另一支60厘米）
8.称量工具：天平、秤9. 纸箱2个（体积视具体情况而定）
步骤：
第一次培养
1.称量水400克倒入小塑料盆。
2.称取培养基2.4克溶于盆内水中，无需调节PH值，制成培养液。
3.取菌种400克加入培养液中，制成菌液。菌种与培养液的比例为1：1。菌液的重量为：水400克＋培养基2.4克（忽略不计）＋菌种400克＝800克，则菌液的体积为800毫升。
4.用漏斗将菌液装入两只500毫升瓶中，拧紧瓶塞。
5.取纸箱1只，将菌液瓶和温度指示瓶分别贴近纸箱内壁放置。再将电灯泡悬挂于箱内中部（距瓶约10厘米），对菌液进行连续光照和保温培养。注意观察温度的变化（25℃-34℃）
这样，3-5天后培养结束，得到约800克的成品菌液，可作为菌种再次培养。
第二次培养
由第一次培养已得菌种800克，根据菌种与培养液1：1的要求。
1.取水800克倒入小塑料盆。
2.取培养基4.8克溶入盆内水中，制成培养液。
3.将菌种800克加入到培养液中制成菌液。则菌液的重量为：水800克＋培养基4.8克（忽略不计）＋菌种800克＝1600克，即体积为1600毫升。
4.取容积为1250毫升、500毫升的塑料瓶各一只，用漏斗将菌液分别装入两只瓶中，拧紧瓶塞。
5.将菌液瓶等放入纸箱，对菌液进行培养，成熟后，可得到约1.6千克的成品菌液，作为下次培养的菌种。
依照上述方法，再经过3次培养，即可得到成品菌液约12.8千克作为菌种。
第六次培养：
1.取水12.8千克倒入广口塑料桶中。
2.取培养基76.8克溶入桶内水中，制成培养液。
3.将菌种12.8千克加入培养液中制成菌液。则菌液的重量为：水12.8千克＋培养基76.8克（忽略不计）＋菌种12.8千克=25.6千克。
4.将菌液留于桶中，内悬电灯泡于液面上10厘米处、温度计于菌液中，桶口覆盖薄膜，进行光照保温培养。
成熟后，可得到约25.6千克的成品菌液，仍作为下次培养的菌种。
第八次培养：
将剩余的水、培养基依次加入盛有25.6千克菌种的广口塑料桶中进行培养，成熟后可得约50千克成品菌液。
样品培养完毕。
室外温度适宜，可将菌液直接置于阳光下培养。
方法一与方法二的区别是：
①无需调PH值；
②菌种与培养液的比例为1：1；
③培养周期短，质量好；
④单位时间总体增菌量少。
3.大规模生产方法介绍
根据光合细菌具有兼性厌氧、生命力强，易于培养等特点，本着便于取材，节约成本的宗旨，现采用"方法二"，以一次培养1吨菌液为例，简要介绍几种形式的培养方法。
1.塑料桶培养法
材料：
①50升的透明或白色清洁广口塑料桶40只
②水1000千克
③菌种1000千克（30亿级）
④培养基半箱（20袋，每袋可培养50千克菌液）。
往每只桶内加入25千克水和半袋培养基（150克）,搅拌使之溶解，再往每桶中加入25千克菌种，制成菌液，将温度计插入菌液中，用透明塑料薄膜覆盖桶口，并用橡皮筋扎紧，使之保持相对厌氧培养状态。
室外温度适宜情况下（25℃-34℃），将菌液直接置于阳光充足的地方培养；温度过低，可用透明塑料薄膜搭建温棚，采光增温，仍达不到要求，应采取其它增温措施；温度过高，将菌液置于通风的地方，仍过高，应在桶周围洒水降温。
如连续晴天，7-10天后可培养成熟；若有阴天，培养时间则相对延长，连续阴天，应采用功率较大的电灯泡悬于桶与桶之间，进行连续光照，由于白色塑料桶相对于透明塑料桶透光性较差，因此培养时间会相对延长。培养成熟后即可得到1吨的菌液（菌种除外）。
2.土池（水泥池）培养法
材料：
①完好的桶状塑料薄膜（长8米，宽2米），塑料薄膜（长7米，宽4米）
②土池（长5米，宽1.8米，深0.4米）
③水1000千克
④菌种1吨（30亿级）
⑤培养基半箱（20袋）
在室外阳光充足的地方，先挖一个长5米，宽1.8米，深0.4米的土池，然后将塑料薄膜覆盖池底，整平，再将桶状塑料薄膜平铺在池中。一端卷叠并压紧以确保密封，置于池外。从加端加入1000千克水，20袋培养基和1000千克菌种，制成菌液。排尽薄膜中空气后，也将此端卷叠密封，置于池外，使菌液保持相对厌氧状态，保持适当的温度和光照，进行培养。如温度过低，用透明塑料薄膜搭建温棚增温。这样，约10天后，可得到1吨的成品菌液（菌种除外）。
补充培养法假设一个池内常备1吨成品菌液，现仅用掉100千克，为保持常备量，只需将100千克清洁水和2袋培养基补充进去，两三天后，即可培养成熟。
以上方法仅供参考，具体操作可根据实际情况而定。
4.培养过程中菌液可能出现的问题及对策
（1）变淡
原因：接种量过少，菌种老化、杂菌过多,PH值过低或过高,光照不足，温度过低或过高，水的硬度过高。
对策：调节至正常状态。
（2）变黑
原因：气温较高的季节，刚培养好的菌液因长时间失去光照。
对策：施以光照。
（3）变绿
原因：可能是菌液中绿硫菌大量繁殖，多见于高温季节。
对策：连续多次密闭培养，或更换菌种和水源。
（4）变灰
原因：接种量少，菌种不纯，光照不足，PH值过低。
对策：选用优质菌种，按要求接种，增强光照，调适PH值。
四、光合细菌的保存
光合细菌生长繁殖除营养条件外，还与光照和温度有关。温度适宜，即使光照不足，也会生长，只是速度缓慢；温度较低，即使光照充足，也很难甚至停止生长；温度过高，则会老化而死。因此保存菌液，温度是关键。
据此，成品菌液应存放在温度较低的地方，15℃以下为最佳，并保持一定的光照（每天不低于2小时），这是因为光合细菌在营养、光照、温度都适宜的情况下，形成一定速度的生长态势，即"生长惯性"，处在生长高峰期的光合细菌生长惯性很强，此时如果突然失去光照或光照很弱，5-10天后，会出现生长旺盛的光合细菌因光合作用失衡，而导致菌体细胞大量死亡，使菌液发黑，并有恶臭。刚开始发黑时，施以适当光照即能缓解。所以刚培养好的菌液应尽量降温，逐步减少光照，以减弱生长惯性。到了生长惯性很弱或没有的时候，光合细菌就进入了稳定期（保存期）。此时阴凉避光保存会延长保存期（六个月）。
当然，削弱生长惯性不单靠降温，减少光照等外部条件，与内因也有很大的关系，如光合细菌生长达到高浓度的时候,由于代谢产物积聚增多,所产生的一些有害因子会抑制本身繁殖；培养基内部的缓冲体，在菌液达到高浓度的时候，也会发挥缓冲的作用。
通常,用户在生产过程中，对菌液的保存无须作特别处理。气温高的季节,在阳光下培养，成熟的菌液仍置于阳光下，不必避光，保存期2-4个月，在此期间可反复培养续种，秋天，气温下降后，培养好一批菌液过冬，冰冻前移至室内避光保存，保存期8-12个月。
总之，保存期的长短，主要取决于温度的高低，温度越低，保存期越长，反之越短。
五、 合细菌菌种的简易提纯
1.菌种提纯
（1）选择性培养基
光合细菌适宜PH值在8.0左右，在9-10的高碱度情况下仍能生长，而一般杂菌适宜的PH值在7.2-7.6左右。若把菌液的PH值调节至9.0，杂菌难以耐受甚至死亡，而光合细菌则可以承受并能生长。这样可筛除一部分杂菌。
（2）选择优质菌种
细菌的生长繁殖一般按倍数的规律增长。假设菌种内的杂菌含量较高，培养几次后，它们在菌液中的比例不会减小，有些杂菌的生长速度较光合细菌快，比例可能还会增大。老化的光合细菌活性较差，菌液内的有害代谢物质较多。
因此，菌种应选用浓度高、活性强、杂菌少鲜紫红色的菌液。
（3）优势接种量
大规模生产过程中，由于水源、容器及空气中的杂菌是不可排除的，因而应加大接种量使光合细菌占绝对优势,这样才能培养出高质量的菌液。光合细菌含量高了,还能释放抑菌酵素，抑制一些杂菌的生长。
究竟多在接种量为好呢？实践证明，正常的接种量应不低于1：5，即菌种1份(30亿级)，培养液5份；培养液不调PH值和提纯菌种时,其接种量应不低于1：1,即菌种和培养液各一份，这样，培养周期短，质量好，缺点是保种量多。
（4）好氧培养
将菌液用增氧机砂头充氧曝气，培养两天，可有效的抑制一些厌氧菌的生长。
（5）厌氧培养
将菌液装入透明密封容器内进行培养，可有效抑制一些好氧菌的生长。
以上几种方法的综合运用，可将光合菌菌液适当提纯，反复接种，从而使不具备专业知识的用户自已也可以生产出优质菌液。
六、 光合菌浓度的简易计算
（1）比例法
取已知血红细胞数的血液与待测菌液各1毫升充分混合，涂片、染色固定、镜检，分别数出视野内血红细胞及待测菌细胞的个数，需重复上述操作十次以上，算出视野内血红细胞以及菌细胞的平均数，即得出待测菌液的浓度，比例式为：
（2）比较法
将待测菌液与已知浓度的菌液进行比较。如它们的红色度，透光度大致相同，则它们的浓度也大致相等，如待测溶液比已知浓度菌液红色度深，透光度低，说明待测菌液浓度高于已知菌液，定量加水稀释待测菌液，使之与已知菌液红色度，透光度相同，那么待测菌的浓度为：已知菌液的浓度乘以待测菌液稀释后的倍数；如待测菌液比已知浓度的菌液红色度浅，透光度高，说明待测菌液的浓度低于已知菌液，定量加水释已知菌液，使之与待测菌液浓度相同，那么，待测菌液的浓度为：已知菌液的浓度除以已知菌液稀释后的倍数。
七、光合细菌的活菌计数及纯菌种分离
采用琼脂固体培养基涂抹培养计数分离法
条件：无菌室、过滤空气鼓风工作台、平皿、接种针、固体培养基、液体培养基、密封玻璃试管、高压锅、加热器、培养箱等。
步骤：（在无菌室内操作）
1.将适量琼脂固体培养基高压蒸煮(120℃)20分钟后，倒入若干个平皿冷却到45℃以下，制成固体培养基待用。
2.取待测光合细菌菌液，分别用蒸馏水以10万倍、50万倍、100万倍、500万倍、5000万倍、10000万倍 稀释。
3.分别从每个稀释倍液中取1毫升的样本各10个，均匀涂布于贴好相应标签的平皿内固体琼脂培养基平面上。
4.将平皿放入培养箱培养12-50个小时，如菌落未长成，再继续培养，直到有明显的菌落长成为止。
5.各种菌的菌落颜色、形状各不相同，根据光合细菌菌落特征，找出光合细菌菌落，并计数。取同稀释倍液10个样本菌落的平均数，乘以它的稀释倍数，即可大约得出待测菌液每毫升含光合细菌的活菌数。取各稀释倍液算出的每毫升含光合细菌活菌的平均数，即可较为准确地检测出该待测菌液的浓度。实际操作并不如此简单，因为菌落有杂菌和光合菌交错在一起的，也有两个以上光合细菌菌落合在一起的，很难分辨计数。
6.用接种针将光合细菌菌落挑出，用适量蒸馏水稀释后，再涂布于固体培养基平面上，进行培养，待光合细菌在培养基上再次长成菌落后，在鼓风工作台内用接种针挑出，接入盛有经高压蒸煮灭活过液体培养基的试管内，进行密封厌氧培养，培养好的光合细菌就是纯菌种。
纯菌种的分离是专业性很强的一门技术，只有专业人员，且经验丰富的，才能识别各种菌落，从中分离出有用的菌株。
八、光合细菌的使用剂量、方法及注意事项
光合细菌对各类养殖动物及农作物都有益。表现在成活率高、个体大、免疫力强等方面。特别是育苗阶段，效果更明显。
1.使用剂量（30亿级）
（1）育苗
鱼苗培育：一般施用浓度100-200ppm(1ppm为百分之一，即1立方水体用1克)。常规鱼苗100 ppm，虾蟹苗150-200 ppm，贝苗180-200 ppm，使用周期为5-10天。
（2）成鱼
首次施用10 ppm(即水深1米每亩约用7千克)，以后每次5 ppm(即水深1米每亩约4千克)，周期为10-15天。如常规鱼、虾、蟹、珠蚌、鳗等。
（3）饲料添加
鱼苗5%，成鱼3%，禽畜3%-5%，现拌现喂，喂水添加3%。
（4）种植业
水稻、小麦：每次亩用5千克叶面喷施。水稻秧苗期、孕穗期各用一次；小麦冬肥、拔节期各用一次。
油菜：基肥亩用15千克浇根。窜苔前亩用15千克叶面喷施。
瓜果类蔬菜：每次亩用10千克，幼苗期适量稀释浇根一次，现蕾期喷施一次。
叶菜类蔬菜：每次亩用20千克，生长期浇根或叶面喷施，7天用一次。
花卉：移载后亩用40千克浇根。生长期每次亩用20千克喷施，每15天一次。
茶树：播种基肥亩用80千克。冬肥亩用40千克浇根。萌发期前亩用20千克浇根。叶片生长期亩用15千克喷施，每15天一次。
果树：冬肥亩用40千克浇根。新叶长成后亩用20千克叶面喷施。
（5）环保
污水处理用量：200-1000ppm。
2.使用方法
（1）将光合细菌菌液稀释20-30倍全池均匀泼洒。
（2）将菌液用沸石粉吸附或拌和细土以后撒入池中。
（3）将菌液拌和饲料后投喂。
（4）将菌液稀释10倍后，浸泡鱼种。
（5）拌种、浇根、叶面喷施。
3.注意事项
（1）不可与消毒杀菌剂混合使用，水体消毒须1周后方可使用。
（2）使用前，将菌液光照10小时以上，使用效果更好。
（3）晴天水温20℃以上时使用效果较好。
（4）拌入的饲料应于当天投喂完毕。
（5）应灵活掌握用量和使用的连续性，因为光合细菌在水体中只有形成优势群落后，才能发挥最大的作用。
（6）水体呈碱性时施用效果最好。酸性水体易使鱼类生病，应常用生石灰或烧碱调节PH值至中性或偏碱程度。
（7）光合细菌菌液不能用金属器皿贮存。
（8）培育鱼苗时，在苗种入池前7天全池泼洒，以利于浮游生物生长。
（9）植物萌发期，施用效果最好。
附录：
光合细菌的镜检方法（细菌的涂片和革兰氏染色法）
1.涂片
以灭菌接种环取一滴盐水放于清洁玻片上，然后挑取少许细菌与盐水混匀，均匀涂布。
2.干燥
将标本涂好后，使自然干燥，或在火焰上略烘，但防止过热。
3.固定
将已干燥标本在火焰上来回通过3-4次，可使细菌固定在玻片上。
4.染色，有以下四个步骤
（1）初染：在涂片上加结晶紫染液1分钟后，用自来水冲洗，将水沥净。
（2）媒染：加碘液作用1分钟后，水洗沥净。
（3）脱色：用95%的酒精，约10-30分钟，水洗。
（4）复染：加稀释复红染半分钟，水洗，用滤纸吸干。
（5）干燥后：加香柏油镜检。
（6）观察结果：革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
huyidao068 于 2010-10-10 20:02 补充以下内容
我今年用的是“江苏仪征市诚信微生物制品厂”生产的光合细菌培养基。 |
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