水生微生物种类太多,用途不同,分离和培育的方法各有差异。常用的水生益生菌是将从国内外菌种保藏机构和科研部门引进或从国内外保健产品、生物制品以及从土壤、池塘、河沟、湖泊、海底等得到的益生菌菌种分离和纯化,针对性取得的目标样品。利用不同的富集培养基和培养方法进行富集培养,并利用选择培养基分离出目标菌株,然后采用不同的纯化方法(平板分离和显微镜下单细胞挑取法)。常用的纯化方法为平板分离纯化(包括稀释法和划线法)。选取目标菌株后,观察菌落特征并结合显微镜检测个体形态、特征后,确定微生物菌株的生理、生化待征和培养特点。
分离技术:取高产塘底泥,于28℃、2 000Lx光照下进行富集培养3~4d后,培养液呈绛红色,连续接3次,然后采用改良的Hungate厌氧培养技术——柱滚管法进行分离纯化,用分离培养基的琼脂柱穿刺培养后保存。
根据目标微生物的生理、生化特征,以及产品的应用范围和要求确定不同的生产工艺。液体产品用液体发酵法直接培养利用,根据培养菌株适宜的生产温度、湿度、pH值、营养等特征,尽可能以农副产品或加工剩余的产品为主要培养基,以利工业化生产。但产品要求为固体粉末以利保存和运输。要求较高的产品,可采用液体发酵、离心分离或超滤浓缩,然后喷雾干燥。一般可以采用液体发酵、固体吸附、通风干燥,也可以采用固体发酵或液-固发酵、通风干燥工艺。(美国大豆协会国际项目,程宗佳) |
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