抗菌肽知识系列大讲堂（八）

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国内外研究前沿进展情况（一）

对抗菌肽作用机制的研究：Shahabuddin研究发现昆虫抗菌肽对感染蚊子的疟原虫发育的不同时期有不同的作用，主要对疟原虫的卵囊期和子孢子期造成明显的损伤。国内外已对抗菌肽杀伤肿瘤细胞的作用进行了广泛研究，发现抗菌肽对体外培养的癌细胞的作用主要是使癌细胞膜上形成孔洞，内容物外泄，线粒体出现空泡化，嵴脱落。核膜界限模糊不清，有的核膜破损，核染色体DNA断裂，并抑制染色体DNA的合成，细胞骨架也受到一定程度的损伤。通过对荷瘤小鼠的研究证实，抗菌肽能显著抑制ECA腹水瘤荷瘤小鼠腹水的积累;对S180肉瘤和U14宫颈癌的抑瘤率亦达30－50抗菌肽还可以调动机体的免疫机能，从体液免疫方面来反抗癌瘤的入侵。
抗菌肽基因的融合表达： 谢维等合成了家蚕抗菌肽CMIV基因，并将其克隆到金黄色葡萄球菌A蛋白和IgG亲合的结构域ZZ的融合表达载体中，得到Pezz318－CMIVV质粒，以此质粒转化EcoliHB101，得到ZZ－CMIV融合表达的蛋白，用CBr切割后，得到CMIV肽。李秀兰等对天然抗菌肽CMIV的氨基酸序列作了50的改动，根据Ecoli偏爱的密码子人工合成了肽基因片断，重组到测序载体，再将此片断重组到表达载体Pet28上进行表达，融合蛋白经CNBr裂解后，具有与天然抗菌肽相同的生物活性。吴映雅等将柞蚕抗菌肽Ｄ基因连接在牛成纤维细胞生长因子cDNA的上游，在酵母中成功地得到了表达，表达产物具有抗菌活性和牛成纤维细胞生长因子的抗原性。Kevin等HNP和CEME分别与GST、ORRF、IgG结合序列及SPA在Ecoli或Saureus中融合表达，结果在Saureus中虽实现了与SPA的融合分泌表达，但表达产量较低;Zhang等选择RepA蛋白的序列作为抗菌肽的融合表达伴侣，并插入Histag等序列作为纯化亲和位点，实现了在Ecoli中的融合表达。Christsnen B等研究中得到的融合抗菌肽的抗菌活性比其任何一个供体抗菌肽的活性都高。
抗菌肽转基因研究 王志兴等把大麦α－淀粉酶的信号肽序列和抗菌肽Cecropin B基因或Hhiva A基因构成嵌合基因，并把此基因导入马铃薯，结果加信号肽序列的Cecropin B转基因植株发青枯病延迟，病情指数降低。Yarus等用显微注射法将牛气管抗菌肽基因转入小鼠，转基因鼠在牛气管抗菌肽基因控制序列的驱动下成功的表达了牛气管抗菌肽，在鼠乳中的牛气管抗菌肽对大肠杆菌具有抗菌活性。Reed等研究了以IL－2启动子/增强子控制转基因鼠中抗菌肽的合成及随后对布氏杆菌的抑制作用。Reed构建了这样一个DNA片断：Shivala片断，SV40多腺苷酸化/剪切信号肽基因片断，此片断加到鼠IL－2基因5’侧－593─ 110区域。在受精卵精前核时将此融合基因注入受精卵，得到26系小鼠。RT－PCR检测：有两系转基因鼠，当其脾淋巴细胞置于325mg/kg的conA时，可以诱导产生成熟的Shivalam RNA。用一定量的布氏杆菌接种时，有两系小鼠遭到攻击。四星期后，在转基因鼠脾脏组织布氏杆菌比非转基因鼠少得多。David Winder等把编码Ceropin或Melittin的基因放置在MLV的启动子下，转染到EJ细胞，然后把这些细胞注入到裸鼠内，发现这些肿瘤细胞停止生长或生长减弱David Winder等用PCR扩增，Prepromelittin，Premelittin和Prececroppin三种核酸片断，均置于MLV启动子下构建融合基因转染进EJ细胞。三种类型的EJ细胞分别注入裸鼠后，测定50d后的肿瘤生长情况，无抗菌肽基因片断的EJ细胞致瘤率为70，带Cecropin基因片断的EJ细胞致瘤率只有39，PPM为50，PM为65，其抑制肿瘤的效果明显。

love51

好资料，楼主继续继续

hahachina

就目前的生产成本，限于药用。

jiang102197

问题核心是，这个能够给养殖户带来什么效益

四季

抗菌肽在生产实际中应用效果怎么样？是药品还是保健品？

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回复 4# jiang102197


   抗菌肽以其独特的作用机制，结构的优势，是新型抗生素替代品的最佳候选者

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回复 5# 四季


    抗菌肽在医药研究中，效果显著，多处于临床三期阶段，国外对此研究较多。在畜牧养殖业，作为饲料添加剂的应用多由报道，且效果显著，不过目前看来作为动物保健性产品较多，对于抗菌和调节免疫力效果佳。

四季

抗菌肽是抗生素的替代品吗？

任我自由飞

回复 4# jiang102197

大家最关心的当然还是投入和产出比问题，这才是关键！

使用抗菌肽，最主要的优势一个是能够代替抗生素，不会产生药残；另一个是能够广谱抗菌、抗病毒、抗真菌、抗原虫、抗霉菌等病原微生物等。

在猪场里，一个显著地表现就是经过一段时间的使用，猪群稳定，能够有效预防恶性传染病的发生，同时提高母猪生产性能、小猪成活率、促进中大猪的快速增重，缩短出栏时间等。