对《不同底物对植酸酶酶活检测的影响》的质疑，感兴趣者进入

tgz5637

对《不同底物对植酸酶酶活检测的影响》的质疑，感兴趣者进入。

《饲料工业》2007 之28卷第20期，有昕大洋的一篇文章《不同底物对植酸酶酶活检测的影响》，文章结论部分表述“...配成p8810底物溶液的pH为5.4～5.5，而p3168底物溶液的pH为6.4～6.5...”，“...在本实验中，用p8810作为底物的植酸酶活性显著高于用p3168组，与两者之间底物溶液之间pH值得差异有关...”。文章作者的这个结论下得也许太早。是对植酸酶酶活的定义概念理解误差所致。
   以国标GB/T 18634-2002 植酸酶的定义为例，假定昕大洋的检测方法同国标：样品在植酸钠浓度为5mmol/L,温度37度，pH5.5下，每分钟释放1微mol无机磷，为1个酶活单位。从定义看，强调的是植酸钠浓度为5mmol/L和pH5.5，底物溶液最先配置浓度的实际定容浓度为到7.5mmol/L, 所以最后测定时，反应浓度为7.5*4/6=5mmol/L.与定义一致。《不同底物对植酸酶酶活检测的影响》的误解主要是在配置植酸钠时没有先调pH5.5,再定容。因为如果不这么做将导致两种后果，不是植酸钠的浓度不够5mmol/L，就是反应pH必然偏离了pH5.5。与定义不符，导致结果误差。明白了这一点，不论用p8810还是p3168 ,配成的底物溶液pH,都应该是pH=5.5，（卖酶的不能犯这种概念错误）；检测出的结果可能是一样或有差异。至于谁大谁小，应由发酵来源决定。按理论概念，酶的检测应该选用最适底物，才有最大反应初速度，何为最适底物，通过试验测定米氏常数km可以确定,不同菌种来源的植酸酶不能一概而论。
      若是能完善点，再讨论讨论来自不同菌种的植酸酶，作用这两种底物的Vmax, Km 是多少，就更好。
如果哪位有新的高见，欢迎讨论。

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http://www.xumuren.com/thread-161758-1-1.html

http://www.xumuren.com/thread-161558-1-1.html

[ 本帖最后由 tgz5637 于 2008-3-11 08:43 编辑 ]

tgz5637

在sigma网站上已说明p3168 可改用替代品p0109。p3168和p0109是植酸12钠水合物（Phytic acid dodecasodium salt hydrate，C6H6Na12O24P6 · xH2O） 。p8810是植酸钠水合物（Phytic acid sodium salt hydrate ，C6H18O24P6 · xNa+ · yH2O
）。  走三家不如坐一家。如果搞不清酶的检验方法是怎样确立的，用不着乱换底物，就用p3168或p0109。
买植酸酶时，记住问清其产品检测标准。

[ 本帖最后由 tgz5637 于 2008-3-24 14:02 编辑 ]