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发表于 2009-7-22 22:44:00
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本帖最后由 蒙古诗人 于 2009-7-22 23:07 编辑
牛奶中水解蛋白掺假的检测原理
目的:
乳制品企业以蛋白质含量计价,部分奶农为了掺水不使蛋白质含量降低,同时也能提高非脂干物质的含量而向原奶中加水解蛋白粉。
2、原理:
用硝酸汞沉淀除去乳酪蛋白,但水解蛋白不会被除去,与饱和苦味酸产生沉淀反应。
3、试剂配制:
(1) 除蛋白试剂:硝酸汞14g,加入100ml蒸馏水,加浓硝酸约2.5ml,加热助溶,待试剂全部溶解后加蒸馏水至500ml。
(2) 饱和苦味酸溶液:称取2克固体苦味酸于烧杯中,用冷却的蒸馏水定容至100ml,后将定容好的溶液倒入烧杯中煮沸(沸腾即可),然后将液体冷却,待结晶析出后将上清液倒入试剂瓶中。
4、操作方法:
取5ml乳样,放入干净干燥的平皿或其他容器内,加除蛋白试剂5ml混合均匀,边加边摇动,不可产生大体积蓄状物,将摇匀的液体过滤于试管中收集滤液(约3ml左右),然后沿试管壁慢慢加入饱和苦味酸溶液约0.5ml(每加0.5ml约需要40秒),切勿使滤液与苦味酸混合,(加入的苦味酸溶液层如超出总液体体积的1/4则表示实验失败);加入苦味酸后立即用黑色比色板做底色观察样品(5s以内),判定结果。
5、结果判断:
按环层颜色变化判定结果:
阴性:饱和苦味酸的液相与无色的滤液液相扩散状态清晰,无白色圆圈状或无黄褐色沉淀圈,试管底部滤液仍有部分未与饱和苦味酸混合。
阳性:出现白色或黄褐色沉淀圈(沉淀圈表现为较明显清晰的环状层面),甚至出现沉淀层。
掺水解蛋白粉越多,滤液越不透明,白色沉淀越明显。最低检出量0.05%。
6、注意事项:
本方法如果牛奶酸度>160T或其它非正常生鲜牛乳(如含有外来添加物、生理病理异常乳等)时容易出现假阳性。 |
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