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我的实验设计,请大家讨论下

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发表于 2008-1-21 18:40:03 | 显示全部楼层 |阅读模式


集团养殖总部兽医实验室
兽医检测实验及其仪器配置

一、
细菌操作:
第一个实验 培养基的制备:

1、目的要求  熟悉培养基制备的基本程序,会制备常用的培养基,会测定并矫正培养基的pH
2、仪器及材料  高压蒸汽灭菌器、电热干燥箱、电炉、天平、量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶、标准比色管、精密pH试纸、纱布、牛肉膏、蛋白胨、琼脂粉、氯化钠、氢氧化钠、脱纤绵羊血等。
3方法与步骤   培养基制备的基本程序  配料溶化测定及矫正pH过滤分装灭菌无菌检验备用。

1)、肉膏汤培养基
    成分  牛肉膏35g,蛋白胨10g,氯化钠5g,蒸馏水1000ml
    制法  将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠加水后,加热溶解。矫正pH7.47.6,过滤分装。置高压蒸汽灭菌器内,121.320min灭菌即成。
    用途

可供一般细菌生长,同时也是制作一般培养基的基础原料。

2)、营养琼脂培养基
    成分  肉膏汤1000ml,琼脂粉2030g
    制法  将琼脂粉加入肉膏汤内,煮沸使其完全溶解,矫正pH7.47.6,过滤分装于试管或三角烧瓶中,以121.3灭菌20min。可制成试管斜面、高层培养基或琼脂平板。
    用途  此培养基可供一般细菌的分离培养、纯培养,观察菌落特征及保存菌种等,也可作特殊培养基的基础。
3血液琼脂培养基  将灭菌的营养琼脂冷至4550,以无菌操作,加入5%10%的无菌血液(或脱纤血),然后倾注灭菌平皿或分装试管制成斜面。供营养要求较高的细菌分离培养,亦可供溶血性的观察和保存菌种用。
4)、半固体培养基  肉汤培养基中加入0.3%0.5%琼脂粉制成,用于菌种的保存或细菌运动性观察。



第二个实验 细菌标本片的制备及染色法:

目的要求 能利用不同的材料进行细菌标本片的制备,会进行常规染色,并认识细菌的不同染色特性。
仪器及材料

酒精灯、接种环、载玻片、吸水纸、生理盐水、美蓝染色液、革兰氏染色液、瑞氏染色液、染色缸、染色架、洗瓶、显微镜、香柏油、乙醇乙醚、擦镜纸、细菌培养物(大肠杆菌、葡萄球菌等)、细菌病料、无菌镊子和剪刀、特种铅笔等。

方法与步骤

1
、细菌标本片的制备

   抹片  根据所用材料不同,抹片的方法亦有差异。
    (1)固体培养物  取洁净的玻片一张,把接种环在酒精灯火焰上烧灼灭菌后,取12环的无菌生理盐水,放于载玻片的中央,再将接种环灭菌,冷却后,从固体培养基上挑取菌落或菌苔少许,与水混匀,作成直径1cm的涂面。接种环用后需灭菌。
    (2)液体培养物  可直接用灭菌接种环钩取细菌培养液12环,在玻片上作直径1cm的涂面。
    (3)液体病料(血液、渗出液、腹水等)  取一张边缘整齐的载玻片,用其一端醮取血液等液体材料少许,在另一张洁净的玻片上,以45°角均匀推成一薄层的涂面。
    (4)组织病料  以无菌剪刀、镊子剪取被检组织一小块,以其新鲜切面在玻片上做35个压印或涂抹成适当大小的一薄层。
    无论何种方法,切忌涂抹太厚,否则不利于染色和观察。
    干燥  涂片应在室温下自然干燥,必要时将涂面向上,置火焰高处微烤加热干燥。
    固定  固定的方法因染色方法不同而异。
    (1)火焰固定  是最常用的方法,将干燥好的抹片涂面向上,在火焰上来回通过数次(一般46次),以手背触及玻片微烫手为宜。
    (2)化学固定  有的血片、组织触片用姬姆萨染色时,要用甲醇固定35min
固定的目的是使菌体蛋白质凝固,形态固定,易于着色,并且经固定的菌体牢固黏附在玻片上,水洗时不易冲掉。
    2、常用的细菌染色方法
    美蓝染色法  在经火焰固定的抹片上,滴加适量美蓝染色液覆盖涂面,染色23min,水洗,晾干或吸水纸轻压吸干镜检,结果,菌体呈蓝色。
    革兰氏染色法
    (1)在固定好的抹片上,滴加草酸铵结晶紫染色液,染13min,水洗。
    (2)加革兰氏碘液媒染,作用12min,水洗。
    (3)95%酒精脱色约30s1min,水洗。
    (4)加稀释石炭酸复红或沙黄水溶液复染30s左右,水洗,吸干后镜检。
    结果:革兰氏阳性菌呈蓝紫色,革兰氏阴性菌呈红色。
    瑞氏染色法  细菌抹片自然干燥后,滴加瑞氏染色液于涂片上以固定标本,13min后,再滴加与染色液等量的磷酸盐缓冲液或中性蒸馏水于玻片上,轻轻摇晃使与染色液混和均匀,5min左右水洗,干后镜检,菌体呈兰色,组织细胞的胞浆将呈红色,细胞核呈蓝色。
   姬姆萨染色法  血片或组织触片自然干燥后,用甲醇固定35min,干燥后在其上滴加足量染色液或将抹片浸入盛有染色液的染缸里,染色30min,或者染色数小时或24h,取出水洗,吸干或烘干,镜检。细菌呈蓝青色,组织细胞浆呈红色,细胞核呈蓝色。
      常用染色液的配制
    1.碱性美蓝染色液
    甲液   美蓝  0.3g95%酒精  30ml
    乙液   0.01%苛性钾溶液  100ml
    将美蓝放入研钵中,徐徐加入酒精研磨均匀后即为甲液,将甲、乙两液混和,越夜后用滤纸过滤即成。新配制的美蓝染色不好,陈旧的染色好。
    2.革兰氏染色液
    (1)草酸铵结晶紫染色液
    甲液   结晶紫  2g95%酒精  20ml
    乙液  草酸铵  0.8g,  蒸馏水  80ml
    将结晶紫放入研钵中,加酒精研磨均匀为甲液,然后将完全溶解的乙液与甲液混和即成。
(2)革兰氏碘液(又称卢戈氏碘液)   1g,碘化钾2g,蒸馏水300ml。将碘化钾放入研钵中,加入少量蒸馏水使其溶解,再放入已磨碎的碘片徐徐加水,同时充分磨匀,待碘片完全溶解后,把余下的蒸馏水倒入,再装入瓶中。
    (3)稀释石炭酸复红溶液   取碱性复红酒精饱和溶液(碱性复红10g溶于95%酒精100ml)1ml5%石炭酸水溶液9ml混和,即为石炭酸复红原液。再取复红原液10ml90ml蒸馏水混和,即成稀释石炭酸复红溶液。
3.瑞氏染色液  取瑞氏染料0.1g,纯中性甘油1ml,在研钵中混和研磨,再加入甲醇60ml使其溶解,装入棕色瓶中越夜,次日过滤,盛于棕色瓶中,保存于暗处。保存越久,染色越好。
4.姬姆萨染色液  取姬姆萨氏染料0.6g加于甘油50ml中,置5560水浴中1.52h后,加入甲醇50ml,静置1日以上,滤过即成姬姆萨染色原液。
临染色前,于每毫升蒸馏水中加入上述原液1滴,即成姬姆萨染色液。应当注意,所用蒸馏水必须为中性或微碱性,若蒸馏水偏酸,可于每10ml左右加入1%碳酸钾溶液1滴,使其变成微碱性。






第三个实验 细菌形态观察:

1、目的要求 能利用显微镜油镜观察细菌的基本形态和特殊结构,并会进行显微镜的保养。
2、仪器及材料 显微镜、香柏油、乙醇乙醚(替代二甲苯,乙醇与乙醚的比例为37)、擦镜纸、细菌染色标本片。
3、方法与步骤

    油镜的识别  油镜是接物镜的一种,使用时需在物镜和载玻片之间添加香柏油,因此称为油镜。可根据以下几点识别。
    1.一般来讲,接物镜的放大倍数越大,长度就越长,作为光学显微镜,油镜的放大倍数最大,故油镜最长。
    2.油镜的放大倍数为90×100×,使用时应查看油镜上标明的倍数。
    3.不同光学仪器厂生产的各类显微镜,往往在接物镜上有一白色色环作为油镜的标记,或直接在油镜头上标有字或“oil”字样,有的标有“HI”字样。
    油镜的使用原理

主要避免部分光线折射的损失。因空气的折光率(n=1.0)与玻璃的折光率(n=1.52)不同,故有一部分光线被折射,不能射入镜头,加之油镜的镜面较小,进入镜中的光线比低倍镜、高倍镜少得多,致使视野不明亮。为了增强视野的亮度,在镜头和载玻片之间滴加一些香柏油,因香柏油的折光率(n=1.515)和玻璃的相近。这样绝大部分的光线能射入镜头,使视野明亮,物像清晰。

   使用方法(以目前生产中使用较多的电光源显微镜为例)
    1.放置  显微镜使用时应放置在洁净平稳的实验桌或实验台上。
    2.调节视野亮度  打开电源开关,尽量升高聚光器,放大光圈,调节亮度调节钮,使射入镜头的光线适中(明亮但不刺眼睛)。
    3.标本片的放置  于标本片的欲检部位,滴加香柏油一滴,将标本片固定于载物台正中,用油镜检查。
    4.镜检  首先,眼睛从镜筒右侧注视油镜头,小心转动粗调节器,使载物台上升,直至油镜头浸没油中,与玻片相接触。然后,一面从目镜观察,一面徐徐转动粗调节器使载物台缓慢下降,待得到模糊物像时,再换用细调节器,直至物像完全清晰为止。
    5.油镜的保养  油镜用毕,应以擦镜纸拭去镜头上的香柏油,如油已干或物镜模糊不清,可滴加少量乙醇乙醚于擦镜纸上,拭净油镜头,并随即用擦镜纸拭去乙醇乙醚(以免乙醇乙醚溶解粘固镜片的胶质使其脱胶,致使镜片移位或脱落),然后,把低倍镜转至中央,高倍镜和油镜转成字形,使载物台和聚光器下降,关上电源,用绸布包好,放入镜箱,存放于阴晾干燥处,避免受潮生锈。
    应该指出,目前所用的显微镜种类很多,尽管油镜的识别和原理是一致的,但在使用上与以上所述有不同,应注意灵活掌握,目前生产中使用较多的是电光源显微镜。
  细菌基本形态的观察
    1.纯培养物标本片(葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、炭疽杆菌等)
    2.血片或组织触片(炭疽杆菌、巴氏杆菌等)

  


第四个实验   细菌分离

目的要求  能利用不同的被检材料进行细菌的分离培养,观察细菌的培养特性,并会进一步移植培养。

仪器及材料
温箱、病料、实验用菌种、营养琼脂培养基、肉渣汤(疱肉)培养基、接种环、酒精灯、烙刀、镊子、剪子等。


方法与步骤
细菌的分离培养  
    1.平板划线分离法  
    平板划线是通过将被检材料连续划线而获得单个菌落,因而划线愈长,获得单个菌落的机会也愈多。具体操作步骤如下:
    (1)右手持接种环于酒精灯上烧灼灭菌,待冷。
(2)无菌操作取病料  若为液体病料,可直接用灭菌的接种环取病料一环;若为固体病料,首先将烙刀在酒精灯上灭菌,并立即用其将病料表面烧烙灭菌,然后用灭菌接种环从烧烙部位插入组织中缓缓转动接种环,取少量组织或液体。
    (3)左手持平皿,用拇指、食指及中指将皿盖打开一侧(角度大小以能顺利划线为宜,但以角度小为佳,以免空气中细菌污染培养基)
(4)将已取被检材料的接种环伸入平皿,并涂于培养基一侧,然后自涂抹处成3040°角,以腕力在平板表面轻轻地分区划线。
在细菌病诊断或药敏试验时,为了提高效率,常可将皿盖放于酒精灯附近,左手持培养基,使划线的平面与右侧台面的角度小于90°且在酒精灯附近,右手持接种环取病料连续划线。
    (5)划线完毕,烧灼接种环,将培养皿盖好,用记号笔在培养皿底部注明被检材料及日期,倒置37温箱中,培养1824h观察结果。凡是分离菌应在划线上生长,否则为污染菌。
    2.倾注分离法  3支融化后冷至50左右的琼脂管,用灭菌的接种环取一环培养物(或被检材料)移至第一管中,随即用掌心搓转均匀,再由第一管取一环至第二管,搓转均匀后,再由第二管取一环至第三管经同样处理后,分别倒入三个灭菌培养皿中,待凝固后,倒置于37温箱中培养24h观察结果。
厌氧菌的分离培养

厌氧菌的分离培养常用肉渣汤(疱肉培养基)培养法。先将试管倾斜,使培养基表面露出一点,然后接种被检材料或菌种,接种后将试管直立,即封闭液面。最后置37温箱中培养2448h

   

细菌移植
    1.斜面移植
    (1)左手持菌种管及琼脂斜面管,一般菌种管放在外侧,斜面管放在内侧,两管口并齐,管身略倾斜,斜面向上,管口靠近火焰。
(2)右手拇指、食指及中指持接种环在酒精灯上烧灼灭菌。
    (3)将斜面管的棉塞夹在右手掌心与小指之间,菌种管棉塞夹在小指与无名指之间,将二棉塞一起拔出。
    (4)把灭菌接种环伸入菌种管内,挑取少量菌苔将其立即伸入斜面培养基底部,由下而上在斜面上弯曲划线,然后管口和棉塞通过火焰后塞好,接种环烧灼灭菌。
    (5)在斜面管口,写明菌种名,日期,置37温箱内,培养1824h,观察生长情况。
    2.肉汤移植  方法同上,取少许菌落,迅速伸入肉汤管内,在接近液面的管壁轻轻研磨,并蘸取少许肉汤调和,使菌混和于肉汤中。
    3.从平板移植到斜面  无菌操作打开平皿盖,挑取少许菌落移于斜面管,方法同上。
    4.半固体培养基穿刺接种法  方法基本同斜面移植,但用接种针挑取菌落,由培养基表面中心垂直刺入管底,然后由原线退出接种针。
   细菌在培养基中生长特性的观察
    1.琼脂平板培养基  主要观察细菌在培养基上形成的菌落的特征。
    (1)大小  以直径(mm)表示,小菌落如针尖大,大菌落为56mm,甚至更大。
    (2)形状  有圆形、不规则形、针尖状、露滴状、同心圆形、根足形等。
(3)边缘  有整齐、波浪状、锯齿状、卷发状等。
    (4)表面形状  光滑、粗糙、同心圆状、放射状、皱状、颗粒状等。
    (5)湿润度  湿润、干燥。
    (6)隆起度  表面隆起、轻度隆起、中央隆起、脐状、扣状、扁平状。
    (7)色泽和透明度  色泽有无色、白、黄、橙、红等;透明度有透明、半透明、不透明等。
    (8)质地  分坚硬、柔软或黏稠等。
    (9)溶血性  菌落周围有无溶血环。有透明的溶血环称β型溶血;呈很小的半透明绿色的溶血环称α型溶血;不溶血的为γ型溶血。
    2.肉汤培养基:
    (1)浑浊度  有高度浑浊、轻微浑浊或仍保持透明者。
    (2)沉淀  管底有无沉淀,沉淀物是颗粒状或棉絮状等。
    (3)表面  液面有无菌膜,管壁有无菌环。
    (4)色泽  液体是否变色,如绿色、红色等。
3.半固体培养基  具有鞭毛的细菌,沿穿刺线向周围扩散生长,无鞭毛的细菌沿穿刺线呈线状生长。



第五个实验   细菌生物化学实验
目的要求  了解细菌生化试验的原理、方法及在细菌鉴定中的意义。
仪器及材料  温箱、接种环、酒精灯、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基、醋酸铅蛋白胨水培养基、柠檬酸盐琼脂斜面培养基、MR试剂、VP试剂、靛基质试剂
方法与步骤
    细菌都有各自的酶系统,因此,都有各自的分解与合成代谢产物,而这些产物就是鉴别细菌的依据。所谓细菌的生化试验,就是用生物化学的方法检查细菌的代谢产物。以下是几种常用的生化试验:
   糖发酵试验  有些细菌能分解糖产酸,从而使指示剂变色。试验时,将细菌无菌操作接种于糖发酵培养基中,于37培养2448h,结果有三种:有的只产酸(),有的产酸产气(),有的不发酵(-)
    甲基红(MR)试验与维-培(VP)试验  取菌接种于2支含0.5%葡萄糖蛋白胨水培养基中,置37温箱培养4d,分别作甲基红和维-培试验。
    1.甲基红试验  取上述培养基一支,加入甲基红试剂(甲基红0.1g溶于95%酒精300ml)56滴,液体呈红色者为阳性,黄色者为阴性,橙色者为可疑。
    2.维-培试验  取上述培养基一支,先加维-培甲液(6%α-甲萘酚酒精溶液)3ml,再加入维-培乙液(40%氢氧化钾水溶液)1ml,混和后静置于试管架内观察24h,凡液体呈红色者为阳性,不变色者为阴性。
    靛基质试验  有些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸产生靛基质(吲哚),遇相应试剂而呈红色。试验时,取菌接种于蛋白胨水培养基中,37培养23d;于培养基中加入戊二醇或二甲苯23ml,摇均,静置片刻后,沿试管壁加入靛基质试剂(配法:对二甲基氨基苯甲醛1.0g95%酒精95ml溶解后,再加浓盐酸50ml)2ml,若能形成玫瑰靛基质而呈红色,则为阳性反应,不变色为阴性反应。
    硫化氢试验  某些细菌能分解培养基中含硫氨基酸如半胱氨酸等产生硫化氢,硫化氢遇醋酸铅或硫酸亚铁则形成黑色的硫化铅或硫化亚铁。用接种针取菌穿刺于含有醋酸铅或硫酸亚铁的琼脂培养基中,37培养4d,凡沿穿刺线或穿刺线周围呈黑色者为阳性,不变色者为阴性。
柠檬酸盐利用试验  取菌接种于柠檬酸盐琼脂斜面上,置37培养4d,如果有细菌生长,使培养基变蓝色,则为阳性,否则为阴性。






第六个实验  细菌药敏实验
原理  各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同,细菌的药物敏感性试验用于测定细菌对不同抗菌药物的敏感度,或测定某种药物的抑菌(或杀菌)浓度,为临床用药或为新的抗菌药物的筛选提供依据。药敏试验的方法很多,普遍使用的是圆纸片扩散法。
目的要求

掌握圆纸片扩散法测定细菌对抗生素等药物的敏感试验的操作方法和结果判定,明确药敏试验在实际生产中的应用。

仪器及材料

接种环、酒精灯、试管架、眼科镊子、温箱、普通琼脂平板、抗菌药物纸片、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的培养物。

方法与步骤
1.无菌操作,取细菌培养物,在营养琼脂平板上密集均匀划线。
2.用无菌镊子夹取各种抗菌药物圆纸片(一般在试纸片上标记有药物名或代号),轻轻贴在已接种细菌的琼脂培养基表面,一次放好,不能移动,各纸片间的距离要大致相等。
3.平皿倒置,37温箱中培养1824h
4.结果观察。根据纸片周围有无抑菌圈及其直径大小,确定细菌对抗生素等药物的敏感度。













二、酶联免疫吸附实验(ELISA):
目的要求

掌握ELISA的基本操作步骤,了解猪群猪瘟等抗体监测的意义。

仪器及材料  酶联检测仪、酶标板、微量加样器(配带枪头)、病毒抗原、酶标SPA、阳性血清、阴性血清、待检血清、pH9.6碳酸盐缓冲液、洗涤液(PBS-T)、BSA(牛血清白蛋白)、封闭液、稀释液、底物溶液、30%H2O22mol/L H2SO4溶液、邻苯二胺(OPD)。
方法与步骤
   1.包被

pH9.6碳酸盐缓冲液稀释病毒抗原至1μg/ml,以微量加样器每孔加样100μl,置湿盒内37包被23h

2.洗涤
用洗涤液(PBS-T)将反应板洗涤三次,每次5min,甩干。

3.封闭  以微量加样器在每孔内加封闭液200μl,置湿盒内37封闭3h
4.洗涤

重复第2步。

5.加待检血清  以微量加样器在每孔内加100μl稀释液,然后在酶标板的第1孔加100μl待检血清,以微量加样器反复吹吸几次混匀后,吸100μl加至第2孔,依次倍比稀释至第12孔,剩余的100μl弃去,置湿盒内37作用2h
6.洗涤

重复第2步。

7.加酶标SPA
以稀释液将酶标SPA稀释至工作浓度,以微量加样器每孔加100μl,置湿盒内37作用2h

8.洗涤  重复第2步。
9.加底物溶液显色  每孔加入新配制的底物溶液100μl37避光显色10min
10.终止反应  2mol/LH2SO4溶液终止反应,每孔50μl
11.结果判定  以酶标仪检测样品的A490,检测之前,先以空白孔调零,当P/N≥2.1即判为阳性。
注意:每块ELISA板均需在最后一排的后3孔设立阳性对照、阴性对照和空白对照。
附:常用试剂的配制

1.
包被液(0.05molpH9.6碳酸盐缓冲液)Na2CO3  1.59g  NaHCO3  2.93g  蒸馏水  1000ml

    2.缓冲液(0.01molpH7.4 PBS):NaCl  8.0gKH2PO4  0.2gNa2HPO4  2.9gKCl  0.2g;蒸馏水  1000ml
    3.洗涤液(0.01molpH7.4PBS-吐温20):Tween-20  0.5ml0.01M pH7.4 PBS1000ml
    4.封闭液(1%BSA-PBS-T):BSA  1.0gPBS-T  100ml
    5.底物缓冲液(pH5.0磷酸盐-柠檬酸盐缓冲液):柠檬酸  4.6656gNa2HPO4  7.2988g;蒸馏水  1000ml
    6.底物溶液(临用前新鲜配制,配后立即使用):邻苯二胺(OPD)  40mg30%H2O2  0.15ml;底物缓冲液  100ml
    7.终止剂(2mol/LH2SO4):H2 SO4  22.2ml;蒸馏水  177.8ml

  其他必须配备的实验室基本仪器物品:



离心机 1台
水浴锅
1台
玻璃匀浆器
若干

试验台 1套
空调

1台
实验用水龙头和水池
2个
洗涤用毛刷

包扎用牛皮纸、绳子












  兽医实验室的基本功能及以后的发展方向建议:
1、主要开展以下工作:
(1)
抗体监测

根据各猪场猪群健康状况,定期进行 HCV、PR 、 PRRS等和各类病原菌抗体检测和病理分析,指导猪场做好防治工作;疫苗质量的监控;对猪的重要传染病的抗体监测和病理分析。
目的:通过以上各项工作,摸清各猪场的疫病流行情况和免疫状况,为制定我公司猪场免疫程序提供了科学依据。

(2)
病毒性疾病的基因诊断:

利用PCR、RT-PCR技术,对于发病猪进行病毒的基因诊断,摸清各猪场HCV、PRRS、PCV和PRV等重要致病病毒的存在和分布情况,以便有针对性地做清除或净化策略。

(3)
开展细菌分离培养、生化鉴定和药敏试验工作

   
从血液或病料中分离出病原菌,通过细菌培养纯化、显微镜观察和生化实验鉴定病原菌的类型,通过药敏试验找到最为敏感的抗菌素,提高治疗效果,减少无效用药。另外,可以从猪场发病猪分离到病原菌并保存,用于测试我猪场购买药品的有效性。


(4)
制作高免血清


利用猪场淘汰的母猪或育肥猪,分别注射大剂量的各种主要疫苗和自家疫苗,之后无菌采血离心分离血清,灭活并进行安全检查后制成高质量的治疗用血清用于临床疾病预防和治疗,保护窗口期的小猪(保育猪)免受病毒和病菌感染;减少药物的使用;生产安全、卫生、无药物残留的优质猪肉。

(5)
每年一次进行猪场寄生虫病普查,根据普查结果制定驱虫方案

猪场主要存在的寄生虫有蛔虫、结节虫、球虫、鞭虫和小袋虫等,通过针对性的预防,上述虫体可得到很好控制,感染率可得到明显降低。

(6)
配制猪场常用的一些药品试剂

电解质补液盐、葡萄糖注射液、疫苗稀释液、生理盐水、碘酒和紫药水等,这些在猪场大量应用,在实验室也易于配置生产,可大大降低猪场的生产成本






2、
效益分析:
(1)
通过为自己公司各猪场做各种大规模的、可重复性的诊断,可大大提高诊断的准确性和可靠性,特别值得一提的是,诊断费用可大大降低,自己检测只需成本费用,仅为在别的公司检测的所需费用的20-30%
(2)
通过对病毒病的流行病学调查,制作高质量的、高抗体滴度的、可靠的高免血清用于处于窗口期保育仔猪的疾病预防和病猪的治疗,细菌分离鉴定及药敏实验,抗体检测和疫苗效果评估,间接地、积极主动地参与到猪场的生产指导中来,在保障猪群健康安全状况中发挥至关重要的作用。
(3)
可以大规模生产一些易于制作的而猪场又用量很大的药品制剂,如电解质补液盐、葡萄糖注射液、疫苗稀释液、生理盐水、碘酒和紫药水等,可以大大降低猪场生产成本;通过科学指导用药,血清可以减少药品的使用,提高治疗的效果。自家疫苗可以提高免疫效果,特别对于一些尚无有效疫苗或免疫不理想的传染病。

综合上述,兽医实验室的建立可以大大降低猪场的生产费用,间接地参与到猪场生产指导中来,其重要性不可低估。
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 楼主| 发表于 2008-1-21 18:42:53 | 显示全部楼层
自己先顶一下,这是我向公司提交的试验室方案。:lairen: :lairen: :lairen:
发表于 2008-1-21 19:11:24 | 显示全部楼层
不懂这个,但你能做出来我觉得你够厉害的
发表于 2008-1-22 09:20:49 | 显示全部楼层
1、想法都不错!
2、可操作性才是关键,不是给老板看的!
3、实验室和实际生产要结合!
4、很多东西说得容易做起来很难!
看下以下分析:
1、在广谱抗生素滥用的前提下,做细菌培养、分离,后做药敏,药敏还有多大意思?大家可以做个药敏看对细菌还算是中敏的已经是寥寥无几了。现在HP、APP培养超困难!如何做药敏?
2、自家苗的制作及使用来控制疾病也不是很明智的选择;
3、寄生虫检测意思大么,特别是现在复方广谱的驱虫药的使用,而且还是4+1的模式驱虫;
4、(酶标仪)血清监测的项目又有多少?
PRRS检测有意思么?
也许只有HC、PRV、FMD还有点意义
5、购买PCR设备可以说是得不赏失价格昂贵,对群控的意义没ELISA好,价值无外乎是对个别病例的确诊而已;
发表于 2008-1-22 11:46:09 | 显示全部楼层

不是

太懂,但是还有要帮着顶一下。
发表于 2008-1-22 12:10:24 | 显示全部楼层
你这是实验操作流程吧!是要购建还是要做什么?
发表于 2008-1-22 12:15:35 | 显示全部楼层
所需要的东西(仪器,试剂甚至是检测方法等等)一定要切合实际需要,即多问自己:是否有必要?是否必须要这样?
 楼主| 发表于 2008-1-22 20:26:49 | 显示全部楼层
这只是个计划,我现在的设想是:
1.猪瘟可做阻断ELISA ,确定打疫苗的最佳时间。
2.伪狂犬可做gI和gE的抗体检测,确定阳性场和阴性场
3.大肠杆菌分离,做自家苗
等等 现在在筹划中
 楼主| 发表于 2008-1-23 20:31:08 | 显示全部楼层
[quote]原帖由 gaolao 于 2008-1-22 09:20 发表
1、想法都不错!
2、可操作性才是关键,不是给老板看的!
3、实验室和实际生产要结合!
4、很多东西说得容易做起来很难!
看下以下分析:
1、在广谱抗生素滥用的前提下,做细菌培养、分离,后做药敏,药敏还有多 ... [/
你说的这些,正是我们要想办法解决的呀!
发表于 2008-1-31 22:42:52 | 显示全部楼层
不过,江西的老表,你算这个得用多少钱吗?
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