大蒜多糖对四氯化碳损伤小鼠肝组织SOD、MDA的影响

貔貅

大蒜中有效成分包括挥发性成分，糖类，肽与各种氨基酸类,多种酶类,硫甙类及甾体甙类。 现代医学、营养学、预防医学的研究证明：大蒜有降血脂、预防动脉硬化、防治冠心病、脑血栓、消炎杀菌、抗肿瘤、提高机体免疫力、保护肝脏、降血压、降血脂和延缓衰老、促进矿物质吸收、防治便秘、治疗肥胖症等多方面的生理功能，大蒜多糖是大蒜的主要成分之一，属于菊糖类的果聚糖，具有特殊的保健作用，开展大蒜多糖的提取、性质、利用等方面的研究，对于发扬我国的大蒜产业优势，有很高的开发应用价值。目前，对于大蒜多糖的研究报道并不多见，本文就大蒜多糖对四氯化碳所致肝损伤小鼠肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）影响进行了探讨。　　1.材料与方法
　　1.1 材料
　　动物：昆明种小鼠40只，雄性、健康，购自兰州生物制药厂。
　　药品、试剂：大蒜多糖，由中国农科院兰州畜牧与兽药研究所提取；1﹪CCl4 橄榄油溶液；冰醋酸（分析纯）；超氧化物歧化酶（SOD）测试盒、丙二醛（MDA）测定试剂盒、组织蛋白测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）。
　　仪器：紫外可见光分光光度计（日本岛津），恒温水浴锅，台式离心机，微量式移液器
　　1.2方法与步骤
　　小鼠随机分为5组，每组8只:正常对照组（I组）、CCl4 模型组（II组）、多糖低剂量组（III组）、多糖中剂量组（IV组）和多糖高剂量组（V组）。禁食12小时，称重，按0.1ml/10g 体重灌胃1﹪ CCl4 橄榄油溶液（灌服组为II、III、IV、V组），I组灌服生理盐水；5小时后III、IV、V 组灌服大蒜多糖，剂量分别为100mg/kg，200mg/kg, 400mg/kg。连续灌服7d，处死前10小时再次灌服1﹪CCl4橄榄油溶液（方法同前）。颈椎脱臼处死小鼠，摘取肝脏进行研磨，制成肝组织匀浆(10%)，按试剂盒说明书在550nm 处测定肝组织中SOD活力，在532nm 处测定MDA含量，同时利用考马斯亮蓝法进行组织中蛋白质的测定。
　　1.3 统计方法
　　组织匀浆中SOD活力的计算:(U/mg prot)SOD 活力=(对照管AO-测定管AO)÷对照管AO÷50%×(反应总体积÷取样量)÷组织中蛋白含量组织匀浆中SOD活力的计算:(nmol/mg prot)
MDA含量=(测定管AO-测定空白管AO)÷(标准管AO-标准空白管AO)×标准品浓度÷蛋白含量对SOD活力、MDA含量结果进行t检验，数据均采用x ±s表示。
　　2.结果
　　2.1大蒜多糖对各实验组肝组织中SOD活力和MDA含量的影响测定结果见　图1.

注：与模型组比较，*表示p<0.05,**表示p<0.01

　　2.2大蒜多糖对各实验组肝组织中MDA含量的影响测定结果见　图2 　　

注：与模型组比较，*表示p<0.05,**表示p<0.01，***表示p<0.001

　　与正常对照组比较，四氯化碳模型组肝脏组织中SOD活力降低，肝脏组织中MDA含量显著升高。100mg/kg的实验组与模型组比较，SOD活力有提高但差异不显著(P>0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)；200mg/kg的实验组与模型组比较SOD活力显著提高(P<0.05),MDA含量差异极显著(P<0.01)；400mg/kg的实验组与模型组相比SOD显著(P<0.01)， MDA变化差异极显著(P<0.001)。 　　4.讨论
　　SOD是体内催化歧化反应的一种抗氧化保护酶，此酶广泛的存在于各种生物中。SOD对机体的氧化和抗氧化平衡起着重要的作用，此酶能清除超氧阴离子自由基（.O2-）保护细胞免受损伤。丙二醛（MDA）是机体通过酶系统和非酶系统产生氧自由基，攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用的过程中产生的，其含量反应机体内脂质过氧化及细胞损伤的程度。我们采用四氯化碳诱导的急性肝损伤模型,其机制主要是四氯化碳进入机体后在肝脏经细胞色素P450激活为自由基·CCl3 攻击肝细胞膜上的磷脂分子,继而与膜脂质和蛋白质大分子进行共价结合,使蛋白质代谢障碍,引起膜结构和功能完整性的破坏。另外,·CCl3 可抑制细胞膜和微粒体膜上钙泵的活性,使Ca2 + 内流增加。两种途径最终导致脂质过氧化物反应,细胞内MDA含量增加,SOD活性下降。从图中可知，CCl4对肝脏SOD的影响较对MDA的缓和，在灌服大蒜多糖后，对两者的影响作用均呈现一定的量效关系。在剂量为400mg/kg时，SOD的活力几乎恢复到正常水平，而对于MDA，它们之间还存在着一定差距。本实验结果表明低浓度大蒜多糖对CCl4所致的化学性肝损伤有一定的缓解作用；中浓度大蒜多糖对肝损伤的缓解作用相对较强；高浓度大蒜多糖有良好的缓解作用。这可能是大蒜多糖通过稳定细胞膜结构、抑制脂质过氧化而发挥作用的结果。