（转）:::::益生菌对断奶仔猪生长表现、微生物区系:::::

tony2005428

张振斌, 林映才, 蒋宗勇, 林 勇, 禹慧明

（广东省农业科学院畜牧研究所，广东 广州 510640）



摘 要：为研究不同益生菌对断奶仔猪生长表现、微生物区系和小肠黏膜绒毛结构的影响，试验选用7 kg杜×(长&#8226;大）三元杂种断奶仔猪112头，按体重、性别、窝别分至如下7个处理组：（1）对照组（不添加益生菌）；（2）200×10-6肠球菌制剂组；（3）1 000×10-6肠球菌制剂组；（4）200×10-6乳杆菌制剂组；（5）1 000×10-6乳杆菌制剂组；（6）200×10-6肠球菌与乳杆菌的混合菌制剂组；（7）1 000×10-6肠球菌与乳杆菌的混合菌制剂组。每处理2个重复（栏），每重复8头猪。测定断奶后两周和试验全期仔猪的生长表现，以及断奶两周末仔猪胃内容物pH、回肠内容物微生物区系、小肠黏膜绒毛高度与隐窝深度。结果表明， 1）在断奶后两周内，益生菌极显著增加仔猪日采食量与料重比，各试验组均值分别较对照组高14%和10%（P<0.01），益生菌有提高仔猪日增重的趋势（P=0.090 1），其中，1 000×10-6乳杆菌制剂组仔猪日增重较对照组增加20.6%（P<0.05）；在试验全期（7～19 kg），益生菌降低仔猪采食量（P<0.05），而对日增重与料重比没有影响（P>0.05）。2) 益生菌对断奶后两周末仔猪胃内容物pH（P=0.841 8）、回肠大肠杆菌（P=0.503 9）及乳酸杆菌数量（P=0.139 7）均无显著影响。3)益生菌对仔猪绒毛高度/隐窝深度比值影响显著，各试验组均值较对照组增加17.7%(P=0.023 8)，并有增加小肠黏膜绒毛高度的趋势，试验组小肠黏膜绒毛高度均值较对照组高12.8%(P=0.053 8)，但对仔猪小肠黏膜隐窝深度没有影响（P>0.05）。以上结果提示，益生菌能提高断奶仔猪的生长表现，改善小肠黏膜结构，不失为抗断奶应激添加剂的一种理想选择。

关键词：益生菌；仔猪；生长表现；微生物区系；小肠黏膜结构


仔猪断奶后肠道内环境及微生物区系发生改变，乳酸杆菌数量减少，大肠杆菌数量增加，同时引发小肠黏膜绒毛缩短，隐窝加深（Etheridge 等,1984；Hampson,1985；Cera等，1988；Kelly等，1991a,b；张振斌等,2000），导致仔猪以腹泻、生长差为特征的“早期断奶综合征”。为克服或缓解早期断奶应激反应，国内外学者采用外源添加益生素或益生元来改善仔猪消化生理，提高仔猪生产性能（Siuta,2000 ；Jin等,2000）。同时，由于抗生素的药物残留问题，使得人们对规范合理使用抗生素引起重视，这样可用的抗生素品种与剂量都很有限，因此迫切需要研制出安全、绿色、环保型饲料添加剂来替代部分抗生素。为此，本试验研究不同益生菌制剂对仔猪生长表现、微生物区系和小肠绒毛结构的影响，为寻求抗断奶应激剂及抗生素替代品提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物与分组

选用7 kg杜 × （长&#8226;大）三元杂种断奶仔猪112头，按体重、性别、窝别分至如下7个处理组：（1）对照组（不添加益生菌）；（2）200 × 10-6肠球菌（enterococcus faecium）制剂组；（3）1 000×10-6肠球菌制剂组；（4）200×10-6乳杆菌（lactobacillus acidophilus）制剂组；（5）1 000×10-6乳杆菌制剂组；（6）200×10-6肠球菌与乳杆菌的混合菌制剂组；（7）1 000×10-6肠球菌与乳杆菌的混合菌制剂组。其中，肠球菌制剂含肠球菌2×1010 cfu/g，乳杆菌制剂含乳杆菌1×1010 cfu/g，混合菌制剂含肠球菌4.2×108 cfu/g，含乳杆菌8.4×108 cfu/g，含枯草芽孢杆菌4.2×108 cfu/g。每处理2个重复（栏），每重复8头猪。

1.2 试验饲粮及饲养管理

试验基础饲粮配方与营养水平见表1。对照组不添加益生菌或益生元，试验组以载体等量替代不同品种和剂量的益生菌制剂。试猪饲养管理同正常商品猪生产，自由采食与饮水。

表1 基础饲粮组成与营养水平

原料 比例(%) 营养指标 营养水平

玉米

次粉

大豆粕

鱼粉

乳清粉

大豆油

磷酸氢钙

石粉

赖氨酸

小苏打

食盐

添加剂预混料 58.53

6.00

22.10

5.00

5.00

0.50

0.39

0.84

0.29

0.10

0.25

1.00 消化能(MJ/kg)

粗蛋白质(%)

粗纤维(%)

钙(%)

总磷(%)

有效磷(%)

赖氨酸(%)

蛋+胱氨酸(%)

苏氨酸(%)

色氨酸(%) 13.60

20.00

2.06

0.74

0.57

0.36

1.25

0.67

0.80

0.25


注：1.每千克饲粮添加：维生素A22 000 IU，维生素D34 400 IU，维生素E 50 IU，维生素K35.0 mg，维生素B1 3 mg，维生素B2 10 mg，维生素B6 8 mg，维生素B12 40 μg，泛酸钙15 mg，烟酸40 mg，叶酸1 mg，生物素0.48 mg，胆碱522 mg，铁200 mg，铜225 mg，锰42 mg，锌165 mg，碘0.36 mg，钴0.21 mg，硒0.30 mg，土霉素250 mg，喹乙醇100 mg；2饲粮营养水平为计算值。

1.3 测试项目与方法

1.3.1 生长表现 试验期间记录每重复组试猪的耗料量，分别于第二周末及第四周末试验结束时称个体重，回称剩料量，以计算试验前两周及试验全期试猪的平均日采食量、日增重与料重比。

1.3.2 胃内容物pH、小肠黏膜结构与微生物区系试验第二周末称重后，分别于对照组、1 000×10-6乳杆菌制剂组及1 000×10-6混合菌制剂组内每重复选取体重相近的试猪2头（公母各一），试猪麻醉开腹后取胃内容物，采用上海雷磁仪器厂生产的PHS－2C型精密酸度计测定内容物pH；于空肠中段切取1 cm肠段，置于含3.8%甲醛的福尔马林溶液中，经脱水、包蜡、切片、HE染色后，电镜拍照测量绒毛高度与隐窝深度；同时，以无菌方法采集回肠消化物1 g，盛入预先配制的培养基内，以定量稀释法测定大肠杆菌和乳酸杆菌数量。

1.4 统计分析

试验数据采用SAS软件GLM过程进行方差分析与多重比较。

2 结果与讨论

2.1 生长表现

益生菌对断奶后两周及试验全期仔猪生长表现的影响见表2、表3。

在断奶后两周内，益生菌极显著提高仔猪采食量（P<0.01），多重比较结果表明，除1 000×10-6混合菌制剂组外，其余试验组仔猪日采食量均显著或极显著高于对照组。如将各试验组数据进行合并，则益生菌可提高仔猪日采食量14%；益生菌有提高仔猪日增重的趋势（P=0.090 1），其中，1 000×10-6乳杆菌制剂组仔猪日增重较对照组增加20.6%（P<0.05），其它组间无显著差异；益生菌增加仔猪料重比，各处理组料重比均值较对照组增加10%（P<0.01）。

在试验全期，益生菌对仔猪采食量影响显著，降低采食量4.8%(P<0.05)，而对日增重、料重比及腹泻率没有影响（P>0.05）。

试验中益生菌显著提高断奶后两周仔猪采食量，从而克服了断奶应激引发仔猪采食量的下降，并提高日增重。这与Tkachev等（1995）结果相同。Siuta(2000)用含双歧杆菌、乳杆菌、链球菌及酵母菌的益生素饲喂杜大长初生仔猪，结果表明，益生菌组28日龄平均体重较对照组提高17%(P<0.001)。试验在断奶后两周内，益生菌在10%显著水平上提高日增重，而在试验全期则没有影响（P=0.595 0），即益生菌对仔猪生长的影响随试验期延长而减弱。Abe等（1995）对初生仔猪饲喂含双歧杆菌、肠球菌及乳杆菌的益生菌，10日龄仔猪体增重较对照组增加75%，至20日龄时，体增重增加22%。由此，益生菌对生产性能的作用效果与添加时间长短、仔猪年龄及体重等相关。

表2 益生素对断奶仔猪生长表现的影响

项目 对照 肠球菌

200×10-6 肠球菌

1000×10-6 乳杆菌

200×10-6 乳杆菌

1000×10-6 混合菌

200×10-6 混合菌

1000×10-6 SEM P值

始重(kg)

末重(kg)

日采食量(g)

日增重(g)

料重比 7.05

11.19b

396cB

296b

1.34cBc 7.05

10.94b

443bB

278b

1.59abAB 7.05

10.50ab

441bB

318ab

1.39bcBC 7.08

11.00b

446bB

283b

1.58abAB 7.05

12.04a

444bB

357a

1.25cC 7.04

11.35ab

550aA

308ab

1.79aA 7.04

11.48ab

391cB

317ab

1.24cC 0.01

0.21

11

16

0.06 0.9984

0.0816

0.0003

0.0901

0.0024

注：同行肩注小写字母相同表示差异不显著(P＜0.05)，不同表示差异显著(0.01＜P＜0.05)；同行肩注大写字母不同表示差异极显著(P＜0.01)，下同。

表3 益生菌对试验全期仔猪生长表现的影响

项目 对照 肠球菌

200×10-6 肠球菌

1000×10-6 乳杆菌

200×10-6 乳杆菌

1000×10-6 混合菌

200×10-6 混合菌

1000×10-6 SEM P值

始重(kg)

末重(kg)

日采食量(g)

日增重(g)

料重比

腹泻率(%) 7.05

18.24

626abAB

400

1.57

6.06 7.05

18.39

580bcAB

405

1.44

3.54 7.05

18.43

565cB

407

1.39

2.32 7.05

18.16

563cB

398

1.43

2.14 7.05

19.69

651aA

452

1.44

3.36 7.04

18.24

598bcAB

400

1.50

2.86 7.04

18.54

617abAB

411

1.50

2.65 0.01

0.59

13

21

0.07

0.96 0.9884

0.5945

0.0161

0.5950

0.5686

0.2056

2.2 胃内容物pH与回肠微生物区系

益生菌对断奶后两周末仔猪胃内容物pH与回肠微生物区系的影响见表4。

益生菌对断奶后两周末仔猪胃内容物pH（P=0.841 8）、回肠大肠杆菌（P=0.503 9）及乳酸杆菌数量（P=0.139 7）均无显著影响。胃肠道pH与微生物区系二者具有协同作用，都与饲粮、试猪年龄及试验期长短等有关。本试验益生菌对胃内容物pH与回肠大肠杆菌及乳酸杆菌数量的影响不显著，一方面可能与均数标准误数值较高，测定误差较大有关；另一方面可能是试验重复数较少，从统计上掩盖了试验的真实处理效应。

表4 益生菌对断奶后两周末仔猪胃内容物这pH、回肠微生物区系的影响

项目 对照 乳杆菌1000×10-6 混合菌1000×10-6 SEM P值

pH

大肠杆菌数(×10-6cfu/g)

乳酸杆菌数(×10-6cfu/g) 3.74

17.67

21.75 3.92

24.33

19.10 3.61

32.75

27.50 0.37

6.58

39.70 0.8418

0.5039

0.1397

2.3 小肠黏膜结构

益生菌对小肠黏膜结构的影响见表5。

试验中益生菌对仔猪小肠黏膜隐窝深度没有影响（P>0.05），但显著影响仔猪绒毛高度/隐窝深度比值，各试验组均值较对照组增加17.7%(P=0.023 8)。同时，益生菌有增加小肠黏膜绒毛高度的趋势，试验组小肠黏膜绒毛高度较对照组高12.8%(P=0.053 8)。小肠黏膜绒毛高度与绒毛高度/隐窝深度比值是决定仔猪消化吸收功能的结构基础。Pluske等（1996）、Van Beers Schreurs等（1998）、McCracken等（1999）研究表明，采食水平高低与仔猪小肠黏膜绒毛高度及隐窝深度有关，高采食水平可促进小肠黏膜的发育。本试验断奶后两周内仔猪采食量显著增加，因此，试验中小肠黏膜绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度比值的增加可能是采食量增加的结果，即外源添加益生菌通过提高仔猪采食量促进小肠黏膜的发育，从而增进对营养物质的消化吸收功能。

表5 益生菌对断奶后两周末仔猪小肠黏膜结构的影响

项目 对照 乳杆菌1000×10-6 混合菌1000×10-6 SEM P值

绒毛高度(μm)

隐窝深度(μm)

绒毛高度/隐窝深度 500b

145

3.45b 580a

144

4.03a 548ab

134

4.09a 20

6

0.14 0.0538

0.4346

0.0238


3 结论

益生菌增加仔猪断奶后两周内采食量和料重比，降低试验全期（7～19 kg）仔猪采食量；改善断奶后两周末仔猪小肠黏膜绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度比值，而对小肠黏膜隐窝深度、胃内容物pH、回肠大肠杆菌、乳酸杆菌数量及试验全期仔猪日增重和料重比均无显著影响。