感染非瘟后存活的猪并不会长期带毒！99天后能完全控制和消灭病毒！

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本文整理了来自德国因塞尔里姆斯弗里德里希-洛弗勒研究所的一份针对猪ASFV带毒状态的研究报告，实验用了36头猪，历时165天，得到了一个明确的结果：阴性哨兵猪与实验感染猪在感染后99天混栏没有转阳，实验感染存活的猪组织中也没有分离到病毒，表明存活下来的感染猪并不会长期带毒，而是随着时间的推移，病毒载量逐渐降低，并最后完全清除病毒。这一结果也与之前的几项研究结果一致。

总体来说，没有看到任何感染中等毒力的ASFV后仍然存活的猪存在带毒状态。血液中病毒基因组的长期可检测性不仅是一个风险，也是一个诊断的机会。在至少90天内，PCR将能够在受感染的猪身上检测出病毒。

作者：A. Petrov | J. H. Forth | L. Zani | M. Beer | S. Blome

作者均是来自德国因塞尔里姆斯弗里德里希-洛弗勒研究所诊断病毒学研究室和传染病研究室的研究人员

编译：猪译馆蔚飞

这项研究采用实验使用被认为是I型的中等毒力的ASFV分离株（荷兰86株）作为模型病毒，用36头猪，30头猪为实验感染猪（C猪），6头猪为阴性哨兵猪（S猪）。本实验在C猪感染后的第164/165天结束。得到了一个明确的结果：实验感染猪在感染后99天后，阴性哨兵猪与其混栏没有转阳，实验感染存活的猪组织中也没有分离到病毒，表明存活下来的感染猪并不会长期带毒，而是随着时间的推移，病毒载量逐渐降低，并最后完全清除病毒。研究要点摘录如下：

一、30头5~6月龄健康杂交家猪，用2ml含有2×104 HAU的荷兰86株ASFV的细胞培养上清液用滴鼻的方式进行感染。在感染后的32天内，有10头猪因ASFV死亡，1头因中枢神经紊乱进行安乐死（28天时），有19头存活。

二、存活的19头猪中，9头在感染91天内，ASFV特异性qPCR呈阴性，其余10头在91天后， ASFV特异性qPCR才呈阴性。

三、所有接种的猪都出现了包括发烧在内的临床症状。大多数的猪，在接种后4-6天就首次出现临床评分和体温升高，最晚的是接种后24天。急性期平均每头猪持续8-10天（4-19天不等），临床评分最大值为7-14分。

四、在试验过程中，在所有30感染猪的血液样本中均发现了非洲猪瘟病毒基因组和活病毒。首批阳性结果在3-21天检测到。从第3天开始，qPCR阳性猪的数量稳步增加，直到29天时所有猪都出现阳性结果。

五、在10和14天时检测到最高的基因组载量，最大Cq值为18-19。在第29天，Cq值下降了6，在接种ASFV第42 天时，6头猪首次出现qPCR阴性结果，48天达到7头，63天达到10头。91 天后，52%的C猪qPCR结果仍为阳性，且基因组载量下降(cq28 - 30)。

六、血吸附试验在血清中首次检测到ASFV与全血的qPCR结果一致。随后，血吸附试验阳性样本量迅速下降，直到从第63天开始所有存活的猪呈阴性。从血液中清除需要>90天（尽管从第63天开始就检测不到活病毒了），因此，我们可以说病毒存留时间很长。鉴于ASFV被认为是安全地被包裹在红细胞膜中（Bastos et al., 2003; Gallardo et al., 2009），这些结果可能与猪红细胞的最大寿命是约65~85天有关（Liebich, 2003）。

七、在每只实验感染的猪的各种拭子样本中（包括：粪拭子、口咽浅表拭子、口咽拭子），均观察到了不同程度的散毒情况。口咽样本的阳性结果更多，基因组载量更高（最大Cq值28），并且在接种后第63天都还能监测到阳性结果。到91天后所有样本没有检测到阳性，可以猜测，91天后，才没有散毒。

八、试验期间，3头C猪和1头S猪因为非相关的原因被安乐死（接种28天时有1头C猪，接种86天时有1头C猪，128天时有1头C猪，135天时有1头S猪）。

九、在感染后的第99天，将存活的19头C猪重新混群，并将6头健康的S猪混入其中（每组2头），这6头S猪在暴露于C猪前也没有ASFV和相关抗体。在暴露开始后的28天内，用血吸附试验和常规PCR 对这些猪进行四次临床评估和采样，分别为感染后的第105、112、119和126 天。随后，实验措施集中在临床观察和必要时的病理形态学研究。直到试验结束时，即人工感染后第164天，所有健康的s猪和所有存活的C猪，均未检测出非洲猪瘟病毒。其中包括1头S猪的11个胎儿脾脏样本。

十、也就是说，在感染第99天后，幸存的猪能完全控制和消灭病毒，不会再散毒。

十一、但是如果有蜱虫出现的话，情况就有可能不同，这个试验讨论的不是通过肌肉注射/静脉注射感染易感动物，所以，如果要想成功复养，还必须消灭蜱虫。

十二、在风险评估方面，必须考虑到最坏的情况。如果野猪死于其他原因，那么尸体就可能成为易感动物的一个感染源。在这种情况下，我们必须考虑经口感染而不是非肠道途径。

十三、由于试验中最晚出现临床症状的猪是在感染后24天，所以最稳妥的做法可能是在观察到临床症状后的第115天，即4个月后，才考虑复养计划，可能更为稳妥。

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本文转自：猪译馆、中科名兽医

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