三丁酸甘油酯对肉鸡生长性能、养分表观消化率、屠宰性能、肠道形态及微生物菌...

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　　三丁酸甘油酯对肉鸡生长性能、养分表观消化率、屠宰性能、肠道形态及微生物菌群的影响

　　彭丽莎 孙健栋 史艳云 朱光宁 李卫芬 余东游

　　摘 要：本试验旨在研究三丁酸甘油酯对肉鸡生长性能、养分表观消化率、屠宰性能、肠道形态及微生物菌群的影响。选用 １日龄艾维茵肉公鸡 １８００羽，随机分为 ６组，每组 ６个重复，每个重复 ５０羽。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别饲喂在基础饲粮中添加 ０．１０％、０．１５％、０．２０％、０．３０％、０．４０％三丁酸甘油酯的试验饲粮。试验期 ４２ｄ。结果表明：１）饲粮中添加三丁酸甘油酯有促进肉鸡生长的趋势，其中 ０．２０％三丁酸甘油酯组效果最佳。２）与对照组相比，０．２０％三丁酸甘油酯组的粗脂肪和粗纤维表观消化率均显著提高（Ｐ＜０．０５）；肉鸡屠宰性能有改善的趋势，但差异不显著（Ｐ＞０．０５）；十二指肠和空肠肠绒毛高度均显著提高（Ｐ＜０．０５），隐窝深度有变浅的趋势，但差异不显著（Ｐ＞０．０５）；盲肠乳酸菌数量显著增加（Ｐ＜０．０５），大肠杆菌数量显著减少（Ｐ＜０．０５）。由此可见，饲粮添加三丁酸甘油酯能促进生长性能，提高饲料养分消化率，改善肠道形态和微生物菌群，肉鸡饲粮中三丁酸甘油酯适宜添加量为 ０．２０％。

　　关键词：三丁酸甘油酯；肉鸡；生长性能；肠道形态；微生物菌群

　　丁酸是一种有机酸，能杀菌抑菌，同时它又是结肠的重要能量来源，能维持肠道健康，提高机体免疫力，但丁酸呈液态，易挥发且有臭味，不利于实际生产。因而丁酸盐（主要是丁酸钠）的出现很快引起关注，并得到广泛研究，然而丁酸钠有让饲养员难以忍受的脂臭味，且有研究表明口服丁酸盐吸收过快，到达肠道后段的量很少。而丁酸的前体物三丁酸甘油酯作为一种短链脂肪酸酯，在胃液中不分解，经肠道胰脂肪酶分解，释放较缓慢，且 １ｍｏｌ三丁酸甘油酯能产生 ３ｍｏｌ丁酸。国内研究三丁酸甘油酯在动物生产上的应用较少，且主要集中在断奶仔猪上。国外研究发现，三丁酸甘油酯能促进肉鸡生长，改善胴体组成和肠道健康，提高机体免疫力，但其在肠道的作用机理尚不清楚，且目前国内三丁酸甘油酯在肉鸡上的研究几乎未见报道。为此，本试验以艾维茵（Ａｖｉａｎ）肉鸡为研究对象，旨在探究三丁酸甘油酯对肉鸡生长性能、养分表观消化率、屠宰性能、肠道形态及微生物菌群的影响，为丁酸类产品的选择及其适宜添加量提供参考，为其在家禽生产上的推广应用提供理论依据。

　　１ 材料与方法

　　１．１ 试验材料

　　三丁酸甘油酯：纯度≥９０％，由湖南赛夫特生物科技有限公司提供。基础饲粮参照 ＮＲＣ（１９９４）标准配制，其组成及营养水平见表 １，各组试验饲粮均采用粉状饲料。

　　１．２ 试验方法

　　选用刚出壳的健康艾维茵肉公鸡 １８００羽，随机分为 ６组，每组 ６个重复，每个重复 ５０羽。对照组饲喂基础饲粮，试验 １～５组分别饲喂在基础饲粮中添加 ０．１０％、０．１５％、０．２０％、０．３０％、０．４０％三丁酸甘油酯的试验饲粮。试验分 １～２１日龄（前期）和 ２２～４２日龄（后期）２个阶段，试验期４２ｄ。采用网上平养，每个重复 １栏，用红外灯育雏，自由采食，自由饮水，２４ｈ光照，第 １周温度为３５℃，第 ２周为 ３２～３０℃，第 ３周为 ３０～２７℃，以后维持在 １８～２５℃。各栏饲养条件基本一致。按鸡场常规的免疫程序进行免疫接种。

　　１．３ 检测指标和方法
　　１．３．１ 生长性能

　　试验期间每天观察鸡只的健康状况，记录耗料量和死亡数，在第 ２１天和第 ４２天清晨，以重复（栏）为单位，对鸡群进行空腹称重，计算平均日增重（ＡＤＧ）、平均日采食量（ＡＤＦＩ）、料重比（Ｆ／Ｇ）和成活率（ＳＲ）。

　　１．３．２ 饲料养分表观消化率

　　在 ４２日龄时从对照组和三丁酸甘油酯促生长效果最佳组的每个重复中选取体重相近的 ５只鸡分别放入代谢笼中进行代谢试验，试验期为５ｄ。记录每天的投料量和余料量，收集全部的粪尿，将收集的粪尿于 ６５℃的烘箱中烘成半干样品待用。

　　试验期间自由采食、饮水。饲料养分表观消化率的测定参照张丽英［１０］主编的《饲料分析及饲料质量检测技术》。

　　１．３．３ 屠宰性能

　　饲养试验结束后，从对照组和三丁酸甘油酯促生长效果最佳组中选取体重相近的 ３０羽鸡（每个重复 ５羽），进行宰杀取样，测定屠体质量、全净膛质量、胸肌质量、腿肌质量与腹脂质量，并计算屠宰率、全净膛率、胸肌率、腿肌率与腹脂率。计算公式为：

　　屠宰率（％）＝（屠体质量 ／活体质量）×１００；
　　全净膛率（％）＝（全净膛质量 ／屠体质量）×１００；
　　胸肌率（％）＝（胸肌质量 ／全净膛质量）×１００；
　　腿肌率（％）＝（腿肌质量 ／全净膛质量）×１００；
　　腹脂率（％）＝（腹脂质量 ／全净膛质量）×１００。

　　１．３．４ 十二指肠和空肠肠道形态

　　于 ４２日龄饲养试验结束时，从对照组和三丁酸甘油酯促生长效果最佳组中的每个重复中随机抽选 ３只健康肉鸡，剪断颈静脉处死后立即剖腹，按组织学区分取十二指肠和空肠各 ２ｃｍ，浸入生理盐水涮洗掉内容物后，再浸入布安氏（Ｂｏｕｉｎ’ｓ）固定液 ４８ｈ后待用。检测方法采用常规石蜡切片，苏木精 －伊红（ＨＥ）染色。测量肉鸡的十二指肠和空肠的绒毛高度与隐窝深度。

　　１．３．５ 肠道微生物菌群分析测定

　　在十二指肠形态指标测定中试验肉鸡屠宰后，取出盲肠并结扎，用酒精棉球消毒各结扎口，于无菌操作台中对盲肠内容物进行 １０－８ ～１０－５倍比稀释，每个样品 ４个稀释度，每个稀释度 ３个重复，采用平板菌落计数法进行细菌计数，测定肠道内容物中芽孢杆菌、乳酸菌及大肠杆菌的数量，以每克肠道内容物中细菌个数的对数 ｌｇ（ＣＦＵ／ｇ）表示。其中，大肠杆菌、芽孢杆菌和乳酸菌的鉴别培养基分别采用结晶紫中性红胆盐琼脂（ＶＲＢＡ）、葡萄糖胰蛋白胨琼脂（ＤＴＡ）和乳酸细菌培养基（ＭＲＳ），均购自南京建成生物工程研究所。乳酸菌在厌氧条件下，３０℃培养 ４８ｈ；大肠杆菌和芽孢杆菌均在 ３７℃培养 １８～２４ｈ。培养结束后，对每个培养板上的菌落进行计数，根据菌群的形态、颜色等鉴别这 ３种细菌。大肠杆菌典型的菌落为紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为０．５ｍｍ或更大。芽孢杆菌典型菌落应为近似圆形的白色菌落。乳酸菌典型菌落一般为白色或者淡蓝色。

　　１．４ 数据处理

　　试验数据用平均值 ±标准差表示，采用 ＳＰＳＳ１１．５软件对多组比较进行单因素方差分析（ｏｎｅｗａｙＡＮＯＶＡ），多重比较采用 ＬＳＤ法，２组比较采用独立样本 ｔ检验。

　　２ 结 果

　　２．１ 三丁酸甘油酯对肉鸡生长性能的影响

　　由表 ２可见，试验 ３组对肉鸡促生长效果优于其他各组，且对肉鸡前期的促生长效果要优于后期。与对照组相比，１～２１日龄，试验 ２、３组肉鸡ＡＤＧ分别提高了 ５．７１％和 ８．１３％（Ｐ＜０．０５），试验 ２、３、４组肉鸡 Ｆ／Ｇ分别降低了 ４．４９％、７．０５％和 ０．５３％（Ｐ＜０．０５）；２２～４２日龄，试验 ３组肉鸡ＡＤＧ提 高 了 ５．８６％ （Ｐ＜０．０５），Ｆ／Ｇ 降 低 了４．５２％（Ｐ＜０．０５）；１～４２日 龄，试 验 ３组 肉 鸡ＡＤＧ提 高 了 ６．６７％ （Ｐ＜０．０５），Ｆ／Ｇ 降 低 了５．５６％（Ｐ＜０．０５）。在肉鸡整个生长阶段，添加不同剂量三丁酸甘油酯对肉鸡的 ＡＤＦＩ和 ＳＲ均无显著影响（Ｐ＞０．０５）

　　２．２ 三丁酸甘油酯对肉鸡养分表观消化率的影响

　　由表 ３可见，与对照组相比，试验 ３组的粗脂肪和粗纤维的表观消化率分别显著提高了 ７．５２％和 ８．９０％（Ｐ＜０．０５）；粗蛋白质的表观消化率提高了 ２．５８％，但差异不显著（Ｐ＞０．０５）。

　

　　２．３ 三丁酸甘油酯对肉鸡屠宰性能的影响

　　由表 ４可见，与对照组相比，试验 ３组有改善屠宰性能的趋势，但差异均不显著（Ｐ＞０．０５）。

　　２．４ 三丁酸甘油酯对肉鸡肠道形态的影响

　　由表 ５可见，与对照组相比，试验 ３组肉鸡十二指肠和空肠绒毛高度分别提高了 １１．８３％和１５．１１％（Ｐ＜０．０５）；隐窝深度有变浅的趋势，但差异不显著（Ｐ＞０．０５）。

　　２．５ 三丁酸甘油脂对肉鸡盲肠微生物菌群的影响

　　由表 ６可见，与对照组相比，试验 ３组肉鸡盲肠内容 物 中 乳 酸 菌 数 量 提 高 了 １３．２２％ （Ｐ＜０．０５），大肠杆菌数量降低了 ８．９９％（Ｐ＜０．０５），芽孢杆菌数量变化不显著（Ｐ＞０．０５），乳酸菌 ／大肠杆菌比值升高（Ｐ＜０．０５）。

　

　　３ 讨 论

　　３．１ 三丁酸甘油酯对肉鸡生长性能的影响

　　丁酸已被证明能促进畜禽生长和肠道健康，但其不同添加形式（丁酸盐、包膜丁酸盐、丁酸酯等）的效果及添加量存在很多争议。游金明等［１１］发现饲粮添加 ０．０５％和 ０．１０％的丁酸钠能显著提高 ２２～５８日龄的仔猪 ＡＤＧ，并有提高 ＡＤＦＩ的趋势。刘 丽 华 等［１２］ 发 现 饲 粮 添 加 ０．０２５％、０．０５０％、０．１００％丁酸钠能提高肉鸡 １～１４日龄的体增重，但对 １５～２１日龄的体增重影响不大。Ｐａｎｄａ等［９］研究发现，饲粮添加 ０．４０％和 ０．６０％丁酸钠能显著提高肉鸡增重和饲料转化效率，但添加 ０．２０％丁酸钠与对照组无显著差异。以上研究中能促进畜禽生长的丁酸钠的添加量各不相同，这可能与丁酸钠的纯度、动物品种及饲养环境等有关。另外很多学者认为丁酸盐在肠道吸收过快，而包膜丁酸和丁酸酯能缓释丁酸。董冠等［１３］在饲料中添加 ０．１０％、０．１５％、０．２０％、０．２５％的粉剂丁酸钠和包膜丁酸钠，发现粉剂丁酸钠可提高猪的 ＡＤＧ，但对其 ＡＤＦＩ和 Ｆ／Ｇ无显著影响，而包膜丁酸钠 可 显 著 提 高 ＡＤＧ，降 低 Ｆ／Ｇ。Ｓｍｕｌｉｋｏｗｓｋａ等的研究表明，添加 ０．１０％脂肪包膜丁酸钠能降低 ８～２１日龄鸡的 Ｆ／Ｇ，增加氮和有机物的表观消化率，但对粗脂肪的表观消化率无影响。刘统等

　　指出，饲粮添加 ０．２０％三丁酸甘油酯与对照组相比，仔猪粗蛋白质、粗脂肪和粗纤维的表观消化率分别提高了 ５．８４％、１４．３７％和１６．７０％。本试验中，与对照组相比，０．１５％三丁酸甘油酯组能提高 １～２１日龄肉鸡 ＡＤＧ，降低１～２１日龄 Ｆ／Ｇ；０．２０％三丁酸甘油酯组能提高 １～２１日龄及 ２２～４２日龄肉鸡 ＡＤＧ，降低 １～２１日龄及 ２２～４２日龄 Ｆ／Ｇ；０．３０％三丁酸甘油酯组能降低 １～２１日龄 Ｆ／Ｇ；０．１０％和 ０．４０％三丁酸甘油酯组无显著变化。由此可见，三丁酸甘油酯对肉鸡前期的促生长效果要优于后期，肉鸡饲粮中添加 ０．２０％三丁酸甘油酯的促生长效果要优于其他添加组，此结果与先前的研究报道基本一致。故三丁酸甘油酯在肉鸡饲粮中的添加量不宜过高或过低，本试验结果建议添加量为 ０．２０％。三丁酸甘油酯的促生长原因包括以下 ２方面：一方面，三丁酸甘油酯对动物的生理作用主要是丁酸的作用，能够为结肠提供能量，且极易从肠腔内吸收［１６］；另一方面，三丁酸甘油酯与一般丁酸盐不同，一般丁酸盐在胃和前肠中就已被吸收，解决不了消化道后段的健康问题。而三丁酸甘油酯能顺利过胃，不被胃酸分解，在肠道中经过胰脂肪酶解 后，释 放 出 丁 酸 和 甘 油，在 肠 道 后 段 发 挥作用。

　　３．２ 三丁酸甘油酯对肉鸡肠道形态和微生物菌群的影响

　　丁酸能为肠道提供能量，让肠道发育更好；同时丁 酸 又 是 一 种 酸 化 剂，能 杀 灭 有 害 菌。崔 蕾等［１７］在 肉 鸡 饲 粮 中 分 别 添 加 ０、０．０２５％、０．０５０％、０．０７５％丁酸钠，发现添加 ０．０７５％丁酸钠显著提高了 ２１日龄仔鸡的十二指肠和空肠的绒毛高度和绒毛高度 ／隐窝深度（Ｖ／Ｃ），显著提高了 ４２日龄仔鸡十二指肠绒毛高度。王纯刚等［１８］发现，饲粮添加 ０．３０％丁酸钠能使 １４日龄断奶仔猪隐窝深度变浅，提高 Ｖ／Ｃ，极显著提高盲肠乳酸杆菌数量，有降低大肠杆菌数量的趋势。Ｐａｎｄａ等［９］研究表明，饲粮添加 ０．４０％和 ０．６０％丁酸钠能降低胃和十二指肠 ｐＨ，减少胃和盲肠细菌数量，且 ２种剂量无显著差异，饲粮添加 ０．２０％、０．４０％和 ０．６０％丁酸钠能显著增加十二指肠绒毛高度和隐窝深度。Ｌａｃｏｒｎ等［４］为了将丁酸带到肠道后段，用菊粉包膜丁酸钠饲喂仔猪，发现菊粉包膜丁酸 钠 组 回 肠 绒 毛 高 度 与 比 对 照 组 提 高 了２５％，而空肠绒毛高度和结肠隐窝深度无显著变化。Ｊｅｒｚｓｅｌｅ等［１９］发现，饲粮添加 ０．１５％脂肪包膜丁酸钠可增加仔鸡绒毛高度，对 Ｖ／Ｃ无影响。Ｐｉｖａ等［２０］发现，三丁酸甘油酯和乳糖醇共同添加能增加仔猪空肠绒毛高度，减少隐窝深度。三丁酸甘油酯还能使仔猪盲肠、十二指肠和空肠隐窝深度变浅［６］。总体看来，三丁酸甘油酯能增加肠道绒毛高度，减少隐窝深度，但对不同肠段效果不同；此外，它还能降低胃肠道 ｐＨ，减少盲肠有害菌数量，提高盲肠有益菌数量。本试验中，０．２０％三丁酸甘油酯组肉鸡十二指肠和空肠绒毛高度显著增长，隐窝深度有变浅的趋势，盲肠大肠杆菌数量减少，乳酸菌数量增加，与前人的研究结果一致。这充分说明，丁酸钠和三丁酸甘油酯均能有效改善肠道形态，调节肠道菌群，调控动物炎症刺激反应，促进肠道健康［２１－２２］。但目前由于丁酸的添加形式和添加量不能统一，各种形式丁酸的具体作用机制也不明确，因此寻找更高效更稳定的丁酸类物质，延迟丁酸的释放，有待更深入研究。

　　４ 结 论

　　① 饲粮添加三丁酸甘油酯能提高肉鸡生长性能，且前期效果优于后期，其中 ０．２０％三丁酸甘油酯组效果最佳。

　　② 与对照组相比，饲粮添加 ０．２０％三丁酸甘油酯肉鸡粗脂肪和粗纤维的表观消化率分别提高了 ７．５２％和 ８．９０％，十二指肠和空肠肠绒毛高度分别提高了 １１．８３％和 １５．１１％，盲肠内容物中乳酸菌数量提高了 １３．２２％，大肠杆菌数量降低了８．９９％。

　　③ 综上所述，肉鸡饲粮中三丁酸甘油酯适宜添加量为 ０．２０％。