活性酵母对断奶仔猪盲肠微生物区系的影响

邦士富—渔

试验选取 96头 21 日龄断奶的三元(杜×大×长)杂种仔猪，按体重和性别随机分为4组，每组 3个重复，每个重复8头仔猪，探讨活性酵母对断奶仔猪微生物区系、胃肠道发育和挥发性盐基氮的影响。结果表明，单独添加耐热性活性酵母(10l0 CFU／kg 饲粮)能显著(p<0.05)降低肠道内容物大肠埃希氏菌数和调节肠道微生物菌群平衡。耐热性活性酵母与金霉素组合以及普利菌+金霉素组合也有一定程度调节肠道微生物菌群平衡的能力。添加耐热性活性酵母与金霉素组合能显著提高(p<0.05)28 日龄和 56 日龄断奶仔猪肠绒毛高度。单独添加耐热性活性酵母也能提高 28日龄和 56日龄断奶仔猪肠绒毛高度(p>0.05)。添加普利菌＋金霉素组合对断奶仔猪肠绒毛高度无显著影响(p>0.05)，56 日龄甚至低于添加金霉素的水平。28 日龄和 56日龄断奶仔猪饲粮中添加耐热性活性酵母绒毛整齐，高度明显大于对照组。添加耐热性活性酵母组的结肠挥发性盐基氮含量最低，有降低断奶仔猪结肠挥发性盐基氮的趋势。高温制粒后，普通活性酵母(＋金霉素)在早期断奶仔猪中应用未发现有添加效应。

在自然状态下，猪胃肠道存在平衡的微生物区系。实际生产中，由于食物形态和环境的变化，仔猪早期断奶等应激往往导致消化道微生物菌群失调，使病原菌更易接触胃肠道黏膜上皮靶细胞和大量繁殖，结果导致仔猪腹泻和生长不良。益生菌可通过维持肠道内微生态平衡而发挥作用，因此用益生菌来代替抗生素调节胃肠道微生物区系的平衡，提高动物生产性能已成为动物营养研究热点之一；国内外研究主要集中在乳酸杆菌、芽孢杆菌和双歧杆菌上。活性酵母为美国 FDA规定允许饲喂的益生菌和我国农业部1999 年批准使用的益生素品种。国外有少量研究报道活性酵母在单胃动物中发挥益生菌作用，但结果并不一致，国内尚无活性酵母应用的系统研究报道。研究结果表明，在早期断奶仔猪饲粮中添加耐高温活性酵母有助于提高生产性能，降低腹泻率和提高机体细胞免疫水平。本试验研究活性酵母对断奶仔猪微生物区系、肠黏膜形态和挥发性盐基氮的影响，探讨活性酵母对仔猪的作用效果和机理。

1   材料与方法

1.1   试验动物

选取 21日龄断奶三元(杜×大·长)杂种仔猪 96 头，平均体重为 5.06±0.49 kg，按体重和性别随机分为 4 个处理组，每个处理组 3 个重复，每个重复 8 头仔猪，公母各半。试验时间从仔猪 3 周龄断奶开始，7 周龄结束。

1.2   试验饲粮及试验设计

基础饲粮组成(%)：玉米 58.55；黄粉 3.00；麸皮 2.00；鱼粉 5.00；乳清粉 2.00；豆粕 25.4；石粉 0.74；磷酸氢钙 0.77；豆油 1.00；盐酸赖氨酸 0.32；食盐 0.25；复合预混料 1.00。营养成分含量：消化能 13.56 MJ／kg，粗蛋白质 20.00％，钙 0.76％，磷 0.63％，有效磷 0.42％，赖氨酸 1.35％，蛋氨酸 0.35％。（活性酵母细胞来源为法国乐斯福公司生产的百福菌和普利菌）活细胞数分别为 8×109个／克和 15×109个／克，其中百福菌为特殊包被处理的耐高温产品。

试验共分 4 组：即对照组(添加金霉素 75 克／吨)，百福菌组(1 500 克／吨，不加抗生素)，百＋金组(添加百福菌 1 500 克／吨、金霉素 75 克／吨)，普＋金组(添加普利菌 1 500 克／吨、金霉素 75 克／吨)。

1.3   饲养管理

试验猪饲养于封闭、半漏缝地板式猪舍，每个重复仔猪饲养于一栏。自由采食、饮水。按照常规饲养和免疫程序进行饲养管理。试验过程中每天测定最高、最低舍温，在每天 6:00、14:00、22:00 测定温度、湿度，保持温湿度相对恒定。

1.4   测定指标

1.4.1   试验 10 天屠宰测定，取结肠中段 1 cm，立即置于含甲醛 3.8％的福尔马林液中，经脱水、包蜡、切片、染色、显微镜观察镜下取图和拍照，计算小肠绒毛高度。

1.4.2    试验结束时测定小肠绒毛高度；无菌法采集盲肠内容物 15 克测定微生物区系(乳酸菌数、大肠杆菌数)；采集结肠内容物 10 克，测定挥发性盐基氮(VBN)。

1.5   统计分析

测定结果利用 SAS 软件采用 GLM 程序进行统计分析，并进行多重比较。

2   结果与讨论

2.1   微生物区系

活性酵母对断奶仔猪盲肠微生物区系的影响见表 1。

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一般健康动物体的肠道均具有自身保护功能，以维持胃肠道中菌群的常态平衡，但优势均衡会因仔猪早期断奶应激等因素造成肠道微生物失调。若饲粮中连续使用益生菌，可有效的维持肠中有益菌群常态平衡。酵母菌调节猪肠道菌群代谢的资料较少。采用体外结肠模拟技术发现一种活性酵母菌促进猪后肠微生物代谢。本试验发现，单独添加耐高温活性酵母显著降低(P<0.05) 仔猪盲肠食糜中大肠埃希氏菌数，因而显著降低大肠埃希氏菌／乳腺酸菌的比例(p<0.05)。百福菌十金霉素组合饲粮和普利菌＋金霉素组也有降低盲肠中大肠埃希氏菌浓度和大肠埃希氏菌/乳酸菌的比例的趋(p>O.05)。试验发现添加活性酵母对结肠乳酸菌影响较小，可能因乳酸菌为猪后肠微生物区系中的优势菌之一。本试验表明，单独添加耐热性活性酵母能显著降低仔猪肠道内容物中大肠埃希氏菌数和调节肠道微生物菌群平衡。百福菌＋金霉素组合饲粮和普利菌＋金霉素组也有一定程度调节肠道微生物菌群平衡的能力。此外，普通活性酵母＋金霉素对肠道微生物菌群平衡的调节作用不显著，可能与普通活性酵母的热稳定性不佳有关。本试验未对热加工后饲粮中的活性酵母的含量变化进行分析，因此温度等加工工艺参数对活性酵母的稳定性的影响需进一步研究。

2.2   绒毛结构

小肠绒毛作为小肠的重要组成部分，不但在吸收营养物质上至关重要，且其强有力和有规律的摆动也有助于排斥有害菌群的定植。有报道表明，产酸型活菌制剂按照每头 1.2亿活菌数饲喂新生仔猪，4 日龄小肠绒毛形态发育普遍良好。仔猪断奶往往造成小肠绒毛组织和形态发生很大变化。本试验发现，添加耐热性活性酵母与金霉素组合显著提高(p<0.05)28 日龄和 56 日龄断奶仔猪肠绒毛高度，同时从表 2可知，小肠绒毛高度随着年龄的增加而逐步增加，但56 日龄对照组仍然显著低于(p<O.05)添加耐热性活性酵母＋金霉素的水平。单独添加耐热性活性酵母也能提高28日龄和56日龄断奶仔猪肠绒毛高度(p>0.05)。添加普利菌＋金霉素组合对断奶仔猪 28 日龄肠绒毛高度无显著影响(p>O.05)，56 日龄甚至显著低于添加金霉素的水平(p<O.05)。

file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image004.jpg活性酵母对断奶仔猪小肠黏膜绒毛形态的组织切片结果见图1。28 日龄和 56 日龄断奶仔猪饲粮中添加耐热性活性酵母绒毛整齐，高度明显大于对照组，且排列更加整齐。与对照组相比，添加普利菌十金霉素组合对断奶仔猪肠绒毛结构无显著改善。结果表明，添加耐热性活性酵母显著提高断奶仔猪肠绒毛高度，一定程度上克服断奶应激对肠道造成的损伤。

2.3   挥发性盐基氮

挥发性盐基氮为蛋白质腐败产物中的氨态氮和胺基态氮的总和。尿素在肠黏膜中分解产生氨气，后者严重破坏肠细胞的表面，胺类大多数对动物也是有害的。若能抑制胺类和氨产生，可促进动物体的健康及提高生长。由表 3 可知，添加耐热性活性酵母组的仔猪结肠挥发性盐基氮含量最低．有降低断奶仔猪结肠挥发性盐基氮的趋势。结果表明，添加耐热性活性酵母一定程度上降低了蛋白质在大肠内的腐败产物浓度，降低了胺类物质对肠道黏膜的损伤。高温蒸汽制粒后，普通活性酵母＋金霉素未有类似的添加效应。