中华人民共和国国家标准

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中华人民共和国国家标准

GB/T18651-2002

牛无浆体病快速凝集检测方法


中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

　　1范围
本标准规定了牛无浆体病快速凝集检测方法。
本标准适用于牛无浆体病的诊断。其他动物无浆体病的诊断亦可参照办法。
　　2试剂和器械
　　2.1试剂
　　a）无浆体凝集抗原，4℃保存；
　　b）阴性协同血清（牛血清因子），-70℃"-80℃保存；
　　c）阳性对照血清，-20℃保存；
　　d）阴性对照血清，-20℃保存。
　　以上试剂由制标单位提供。
　　2.2器械
　　2.2.1微量移液器：5μL、10μL或5μL"25μL（连续可调）。
2.2.2微量移液器头若干个。
　　2.2.3试验用板：取85mm×12.5mm洁净透明塑料平板，用油漆或油性记号笔划成4排×6个区位。
　　3操作步骤
实验应在25℃"28℃环境下进行。
　　3.1被检血清按常规采集和分离，从采集到第一次检测前，要在室温放置38h"48h，然后冷藏或冻存备用，长期低温保存会使阳性率下降。
　　3.2取出凝集抗原、阴性协同血清、阳性和阴性对照血清以及被检血清，在25℃"28℃下放置15min"20min。
　　3.3同时在平板第一排左起1、2区位划上阳性（ ）和阴性（-）符号，其余各区位依次编上被检血清号。
　　3.4用微量移液器在编号区位内按号分别加阳性、阴性对照血清和待检血清10μL。
　　3.5在各区位加凝集抗原5μL，靠近血清，互不接触。
　　3.6在各区位抗原旁边加阴性协同血清10μL，互不接触。
　　3.7用牙签将各区位的三种反应物摊成液面（约成人小指甲盖面积），混合均匀。做一份血清换用一根牙签。
　　3.8用手轻轻晃动该平板，在4min"8min内，当阳性对照血清开始出现凝集反应时，对着黑色背景判读结果。
　　4判定标准
　　4.1阳性对照血清出现颗粒清晰的凝集现象。
　　4.2阴性对照血清没有可辨认的任何凝集颗粒。
　　4.3被检血清凡出现可辨认的凝集颗粒的凝集现象，均判为阳性反应。