剖析黄芪多糖佐剂

小华佗

分别将黄芪多糖 提取物、白油-吐温、氢氧化铝作为佐剂制备金黄色葡萄球菌灭活苗混合免疫家兔和奶牛,观察家兔免疫前后血清抗体滴度变化以及攻毒后白细胞数目变化和淋巴细胞百分比变化.对奶牛免疫后测其血清抗体和乳汁中体细胞数变化,结果注射疫苗后乳汁中体细胞数都有所下降黄芪多糖 组较其它组下降较快,幅度较大黄芪多糖 和抗原混合物免疫动物后未见不良反应,且抗原免疫血清抗体比氢氧化铝和白油-吐温佐剂组的抗体滴度增加快,幅度显著增高且抗体维持一个较高水平,而攻毒后家兔白细胞数和淋巴细胞数也较氢氧化铝和白油-吐温佐剂组增加较多.因此黄芪多糖 是一种有效的佐剂. 为此有以下几组实验很好的证明了黄芪多糖 作为佐剂的广泛应用，那么它的作用具体体现在哪里呢？下面我们就综合上述，来对它来个大“解剖”！
      一、将1日龄健康罗曼雏80只随机分为4组,每组20只。分别于1日龄皮下注射生理盐水以及不同剂量的黄芪多糖 ,连续7d,于7、14、21、28、35、42、49、56日龄采血,检测AI和ND抗体效价,探讨黄芪多糖 的免疫佐剂效果。试验结果表明,各组黄芪多糖 均能提高AI-HI和ND-HI抗体效价,其中中剂量组抗体高峰期持续时间长,免疫后期有较高延长抗体存在的趋势,具有较好的免疫辅助效果。 二、14日龄雏鸡200只,随机均分为10组,在用新城疫弱毒苗免疫的同时,6个试验组分别肌肉注射高、低剂量3种修饰的硫酸化黄芪多糖 （sAPS)sAPS40、sAPS50和sAPS60,2个多糖对照组注射高、低剂量未修饰的黄芪多糖 (APS),无佐剂对照组注射等量生理盐水,每天1次,连续3 d.分别于免疫后7、14、21、28 d翅静脉采血测定血清抗体效价;于免疫后14、21、28、35 d心脏采血测定T淋巴细胞增殖.结果表明,3种修饰多糖均能显著提高血清抗体效价、促进T淋巴细胞增殖,作用强于未修饰多糖,并有一定的量效和时效关系,高剂量提高血清抗体效价、低剂量促进T淋巴细胞增殖的效果较好,综合评价以sAPS60最好,可以作为新型免疫增强剂的候选药。 一、黄芪多糖 、人参皂甙Rb1对猪口蹄疫疫苗的佐剂效果及相关机理研究 本试验目的旨在以两种补气中药成分为代表，对中药成分作为疫苗佐剂机制进行研究。进行本试验期望得到一种新型的、经济的猪口蹄疫疫苗的佐剂，提高现有疫苗的保护力，降低现有疫苗的副作用，降低猪口蹄疫的发病率，减少劳动费用，即这种佐剂能刺激机体产生较强的体液免疫和细胞免疫反应，同时，通过对佐剂作用机制的探索，将给新的佐剂开发提供一些试验方法，具有良好的研究意义。试验以常用补气中药黄芪和人参的主要有效成分——黄芪多糖和人参皂甙Rb1为代表，首先黄芪多糖 和人参皂甙Rb1直接与口蹄疫疫苗混匀，通过肌肉注射免疫小鼠和猪，观察口蹄疫抗体效价的变化。试验结果：小鼠一免15d抗体效价与对照组差异不显著HAlog2＜7(p＞0.05)，二免后的小鼠抗体效价HAlog＞7与对照组比较差异极显著(p＜0.01)；黄芪多糖 (0.5mg/只)+疫苗组、黄芪多糖 (0.1mg/只)+疫苗组和人参皂甙Rb1(0.01mg/只)+疫苗组与对照组差异极显著(p＜0.01)，黄芪多糖 (0.05mg/只)+疫苗组和人参皂甙Rb1(0.002mg/只)+疫苗组与对照组差异显著(p＜0.05)。经过免疫的猪一免后抗体效价都没有达到保护免疫效价(HAlog2＜7)，二免15d抗体效价远远高于一免的抗体效价(HAlog2＞7)，二免30d抗体效价比二免15d有些下降，但是高于只经过一免的抗体效价(HAlog2＞7)。总之黄芪多糖 和人参皂甙Rb1均能提高小鼠和猪只的口蹄疫抗体效价，并且随着两种成分浓度的增加对抗体效价的影响也随之增强。随后进行大鼠肠黏膜微血管内皮细胞的培养。通过对内皮细胞第Ⅷ因子相关抗原和硝酸银鉴定，证明培养的微血管内皮细胞第Ⅷ因子相关抗原染色为阳性，AgNO3染色后，黑色的硝酸银颗粒沉积在血管内皮细胞边缘即细胞间隙中，呈棕黄色，细胞间以锯齿状结构连接，体现血管内皮细胞呈现典型的多边形。最后黄芪多糖、人参皂甙Rb1和口蹄疫疫苗同时作用细胞，继续培养一段时间观察内皮细胞NO、IL-6和TNF-α分泌量的变化。试验结果：口蹄疫疫苗(0.1μL/mL)单独作用于肠黏膜微血管内皮细胞，微血管内皮细胞分泌的NO、IL-6和TNF-α极显著的高于对照组(p＜0.01)；黄芪多糖 (450μg/mL)和人参皂甙Rb1(40μg/mL)分别与口蹄疫疫苗(0.1μL/mL)联合作用细胞，微血管内皮细胞分泌NO、IL-6和TNF-α比单独疫苗作用减少，比对照组分泌量高(p＜0.05或p＜0.01)。结果表明：黄芪多糖和人参皂甙Rb1均能起到疫苗佐剂的作用，提高口蹄疫疫苗的抗体效价和保护微血管内皮细胞免受损伤的作用。
     二、黄芪多糖 佐剂及其在I型鸭疫里氏杆菌灭活疫苗中的应用 本发明涉及一种疫苗免疫佐剂和疫苗，具体地说是一种黄芪多糖 佐剂及其在I型鸭疫里氏杆菌灭活疫苗中的应用。该疫苗佐剂为黄芪多糖 溶液，黄芪多糖 溶液浓度为30mg/ml。本发明I型鸭疫里氏杆菌黄芪多糖 灭活疫苗，它由作为疫苗的鸭疫里氏杆菌RA-1灭活菌液和作为佐剂的黄芪多糖 溶液混合而成。本发明提高了传统灭活苗的免疫效果，有效地防控鸭传染性浆膜炎，也为新型免疫佐剂的研究提供依据。本发明疫苗具有良好的安全性和免疫原性，能有效预防鸭传染性浆膜炎的发生。
     三、黄芪多糖 佐剂.........（待续）

xunliliu

怎么待续啊？楼主还真会吊味口哦！

ytythb

做个标记先，期待楼主待续

小华佗

回复 2# xunliliu
有上就有下不要着急！呵呵

小华佗 于 2009-11-3 15:10 补充以下内容

回复 3# ytythb
标记不错对我很有提醒的作用！在此谢谢诶！

flyfish01

热烈期待待续的内容啊，修好吧黄氏多糖在水产中的应用也加入到其中来

小华佗

回复 5# flyfish01
希望得到指点