生殖激素在犬繁殖上的应用

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生殖激素在犬繁殖上的应用

1．母犬不育症

1.5岁以上或以往能正常发情交配的母犬，在较长时间内(10～24个月)不见发情，或发情不正常且屡配不孕的，均可认为是不育症。对于这样的母犬可用孕马血清、绒毛膜促性腺激素进行治疗。用量：血促性素为2OO单位／次，皮下或肌肉注射，1日1次，发情后肌肉注射绒促性素300单位。另外，对于卵巢机能不全或持久黄体存在的乏情犬，肌注FSH 20-50单位，每天一次，连用2-3次，也可诱导发情，此外，应改善饲养管理条件。如仍不能交配受精，则不应作种用。

2。公犬不育症

    公犬不育症主要表现公犬无性欲，见发情母犬阴茎也不能勃起 (阳萎)，或勃起后也不射精，检查精液品质不良。对于这样的公犬应改善饲养管理条件，给以足够的营养物质，以增强体质。要加强体力锻炼，配种要适度，防止过多或过少。同时配合激素治疗，可肌肉注射PMSG或HCG，50-250单位，也可肌肉注射丙酸睾丸素(丙酸睾丸酮)20～50毫克／次。


2、不清楚半衰期，延长用药时间。有一牧羊犬，在发情季节乏情，兽医用生殖激素诱导发情，他选用 PMSG 每次 300IU ，每天一次，连用 7 天。


PMSG就是孕马血清， 它的生理功能是促进卵泡发育。临床上常用来治疗卵泡静止或超数排卵。但是，它的半衰期长， 5 ～ 7 天在血液中还有有效浓度，每个疗程注射一次就行，不用每天注射。


3、注射时间不合理。有些兽医治疗排卵延迟，选用促排三号，不发情就注射，配种时却不注了，达不到促排效果。促排三号是促黄体释放激素 D —色氨酸类似物，它的生理功能是促进卵泡进一步成熟、排卵和促进黄体的形成。正确的使用方法是配种前 4 小时或配种时注射。


4、治疗不孕症用雌二醇。雌二醇是一种雌激素，它的生理功能是促使母畜发情表现和生殖道一系列生理变化，如母畜外阴红肿，分泌物增加，鸣叫，接受爬垮等。它对卵泡发育不起作用，用它治疗不孕症没有效果。



母犬交配全攻略


母犬发情周期介绍及注意事项

母犬的发情与配种是繁殖工作的一个重要环节。只有正确地掌握母犬的性周期性变化和排卵时期，才能做到适时配种，提高受孕率和繁殖力。


一、母犬的性周期


在繁殖学上，根据犬的不同性生理变化，把犬性周期分为四个阶段，即发情前期、发情期、发情后期和乏情期。


1、发情前期：从阴户滴出带有鲜血的粘液开始，到接受公犬爬跨，约8日左右（8.2土2.5日）。在这个时期，卵巢中上一个发情周期所产生的黄体逐渐萎缩，新的卵细胞开始生长；子宫腺体略有生长，生殖道轻微充血肿胀，腺体逐渐增加。其外部表现阴户逐渐充血肿大，排尿次数增加而量少，尿液吸引公犬嗅闻。母犬兴奋不安，喜欢接近公犬并与其戏耍，但无性欲表现（不接受公犬爬跨）。阴道涂片检查时，主要有核上皮细胞和多量红细胞和少量嗜中性白细胞。


2、发情期：从接受公犬爬跨开始到不接受爬跨为止，即从阴户滴血的8－18日。母犬的外阴呈现充血肿胀状态，随着时间的增长，充血肿胀程度逐渐加强，到发情盛期达到最高峰；子宫角和子宫体呈充血状态，肌层收缩加强，腺体分泌活动增加；子宫颈管道松弛；卵巢的卵泡发育很快，多数在发情中期排卵。从外部表现看，早期阴户肿大，未期有所消退，滴出的带血粘液减少，色由鲜红变为淡红，母犬排出的气味显著诱惑公犬追逐和爬跨，当公犬舔其阴户或爬跨时，其四肢站立不动，尾翘起并偏向一侧，阴户屡屡上提，出现性欲要求，交配易成攻。阴道涂片检查时，主要为角质化上皮细胞，缺乏嗜中性白细胞，红细胞早期较多，末期减少。


3、发情后期：发情期过后，即进人发情后期，约持续10日左右，母犬由发情的性欲激动状态逐渐转入安静状态；子宫颈管道逐渐收缩，腺体分泌活动渐减，粘液分泌量少而粘调；子宫内膜逐渐增厚，表层上皮较高，子宫腺体逐渐发育，卵泡破裂，排卵后开始形成黄体。其外部表现为，阴户滴出带血粘液进一步减少，色由淡红变成暗红或无色，肿大消退，多数犬不接受爬跨。阴道涂片检查时，重新出现有核上皮细胞和嗜中性白细胞，缺乏红细胞和角质化细胞。


4、乏情期：指发情后期之后到下次发情前期之间，约6个月左右（7.0土1.5月）。此时母犬的性欲已完全停止，其精神状态已完全恢复正常。在早期，子宫内膜增厚，表层上皮呈高柱状，子宫腺体高度发育，增大弯曲，腺体分泌活动旺盛；在后期，增厚的子宫内膜回缩，呈矮柱状，腺体变小，分泌活动停止；卵巢的黄体已发育完全，因此这个时期为黄体活动时期。其外部表现为阴户干瘪，无带血粘液滴出，不愿接近公犬，不容许公犬爬跨，公犬对其尿液和身体气味不感兴趣。阴道涂片检查时，主要有核上皮细胞和少量嗜中性白细胞，缺乏红细胞。


二、影响母犬性周期的因素


1、季节：犬有季节性繁殖的特点。一般情况下，母犬一年发情两次，每次间隔约6个月左右。单养犬多数在春秋两季发情（3－5月，9－11月）；群养犬（如比格犬）四季各阶段都有发情，季节性不明显，另外，据 Marshall（1906）和 heape（1900）报道，在南美的野生犬和北极圈饲养的犬，也有一年发情一次的，季节性也不明显。


2、年龄：由于年龄增大，老龄犬身体代谢机能下降，发情周期出现紊乱，往往使乏情期延长，而发情前期和发情期缩短。


3、初情期：一般小型犬初情期来的早些（如比格犬初情期时间为6－7月龄），大型犬初情期晚些（如德国牧羊犬初情期则在8－10月龄）。初情的犬，发情前期和发情期都较长。另外，营养和环境温度也影响初情，营养水平高的较营养水平低的早，热带的较寒带或温带的早。


4、营养：由于营养缺乏或过剩（肥胖），也会延长乏情期或导致异常发情。


5、疾病：由于卵巢囊肿、子宫蓄脓等生殖器官疾病往往导致乏情期时间过长，或不发情。还有，上一窝产仔过多、连产几窝等，母犬机体没能很好地得到调整恢复，也会导致乏情期过长。


6、母犬异常发情：（1）安静发情。母犬缺乏发情表现，但其卵巢的卵泡仍发育成熟而排卵。一般当连续两次发情之间的间隔相当于正常间隔的2倍或3倍时，即可怀疑中间有安静发情。引起安静发情的原因可能是由于有关生殖激素不平衡所致。例如当雌激素分泌量不足时，发情表现就不明显。促乳素分泌量不足或缺乏，引起黄体早期萎缩，于是孕酮分泌量不足，也会引起安静发情，因为孕酮分泌量不足，就会降低丘脑下部的中枢对外雌激素的敏感性。（2）短促发情。母犬的发情非常短，如不注意观察，常易错过配种机会。其原因可能是由于发育着的卵泡很快成熟破裂而排卵，以致缩短了发情期，但也有可能就由于卵泡停止发育受阻而引起。（3）断续发情。母犬发情时短时续，发情时间延续很长（有的母犬发情30日还接交配并怀孕），这是因为卵泡交替发育所致，先发育的卵泡中途发生了退化，而另一新的卵泡又再发育，因此产生了断续发情的现象。（4）孕后发情。母犬在怀孕时仍有发情的表现，称为孕后发情或假发情。其主要原因就由于激素机能的混乱，亦即黄体分泌孕酮机能不足，而胎盘分泌雌激素的机能亢进所致。


三、排卵时期与排卵数


1、排卵时期。母犬发情期，即从接受公犬交配开始，39－48小时，未排卵的犬仍占大多数，到90小时后，未排卵的犬就占少数了，排卵过程一直持续到96小时，才全部结束。左右卵巢在排卵时无时间差异。总之，母犬排卵时期从发情初期就开始，一般用以下两点进行判断：①发情滴血第8－14日开始排卵（11.2土3.0天)，②从母犬接受公犬爬跨的第2日或第3日开始排卵。


2、排卵数。犬是多胎动物，在一次发情中左右卵巢可排几个到十几个卵子（6.0士1.7）。小型犬排卵数少些，大型犬排卵数多些，老龄犬、过肥犬排卵数少些，青壮年犬排卵多些。犬的排卵数可根据出生胎儿数进行推断，也可通剖解检查卵巢黄体位点，进行准确判断。一般情况下，排卵数约89％受孕、妊娠，极少在受孕后胚胎死亡或融解。


四、适时配种


母犬发情后，要想做到适时配种，就必须掌握排卵受孕的最佳时期。据报道，在排卵前54－41小时交配，卵子受孕率为79％；在排卵开始到120小时之间交配，卵子受孕率为83％，这是卵子受精最佳时间。因此，交配时机不能过迟或过早。过迟卵子失去受精能力，过早精子失去活力或死亡。在母犬接受交配后2-4日间（即接受交配后60－108小时）交配，受孕率和产仔率最高。


五、母犬发情时应注意的事项


1、加强饲养管理，不能随意散放，严防乱配，导致品种混杂。


2、加强卫生消毒工作，保证周围环境和阴户卫生，防止生殖道感染。


3、如果正在训练中的母犬发情，一般不宜再进行训练，要停训半个月左右。因为发情的母犬兴奋不安，寻求公犬，易产生外抑制，服从性也下降。


4、每日要认真观察记录发情征候，准确掌位发情进入的阶段，以便做到适时配种。


六、配种时应注意的事项


1、初情母犬一般不宜配种，因此时只是性成熟，身体未达到完全成熟，否则会导致自身生长发育受阻，同时也会使繁殖力下降。


2、初配年龄。一般母犬为1.5岁（以第2次发情时交配为宜），公犬为2.0岁。


3、交配次数。母犬在一次发情中，配l－2次，两次间隔以48小时为好。公犬一年配种40－6O次，一周之内不超过2次为佳。


4、交配的时间与地点。南方夏季在早晚进行，北方冬季应上午或下午进行。地点应选择清静的环境，最好是公母犬都熟悉的地方，这对胆小的母犬尤为重要，避免人群影响交配。


5、性经验。初配的母犬，由于缺乏性经验，特别是从小单养的又没接触过公犬的，即使已到发情时，也不让交配，这时只有主人辅助进行（一手抓脖圈一手托下腹部）。初配的公犬，由于缺乏性经验，一旦与母犬接触，往往慌张犹豫，或不经勃起即行爬跨，或出现不完全的性行为，经过几次才能进行正常的性行为。为此应温和对待，否则容易造成性抑制。最好是先让一头有性经验母犬与其配种。


6、公犬性抑制。营养和运动不足、性经验缺乏、公犬连配数头母犬等，都会导致公犬性抑制。除此之外，通常都是由于错误或粗暴的管理导致性抑制。在采精时某些不正确的操作也会造成性抑制。因为性抑制往往是由于交配或采精时的恐惧、痛感和干扰引起的，结果还会变成阳萎。


7、配前性刺激。在交配前不久，通过感觉的性刺激对配种很有利。应当让公母犬一块游戏、追逐一段时间，适当地牵制公犬的性行为。几次的空爬跨，不会因此引起性抑制，经过5－10分钟和4—6次这样的起落的徒劳爬跨，最后反而能提高公犬的射精量和精液浓度，精子活力也良好。配前性刺激不但能提高射精的容量，改进精子密度和活力，而且能引起释放促黄体素，随即提高血中膏酮的浓度。


8、三配三不配和一早一迟：有相同优点、青年犬之间、公犬等级高于母犬的配；三不配：有相同或相反缺点的、老龄犬之间、公犬等级低于母犬的不配；一早一迟：老龄母犬宜早配（以滴血8-10日配），青年母犬宜迟配（以滴血12－14日配）。
母犬排卵时间的确定

母犬的发情周期及排卵时间与其他家畜有较大区别。尤其是排卵时间在发情期间的变化范围较大，常常造成养犬爱好者难以确定其准确的配种时间。下面就对母犬的发情周期及排卵时间的确定方法进行简单的介绍。


1 性成熟及适宜的配种年龄


母犬的性成熟因品种、饲养管理条件及地理环境不同而异，一般来说，小型犬达到性成熟的年龄早，而大型犬达到性成熟的年龄要晚一些。达到性成熟的时间一般在6-13月龄的范围内，配种时间应较性成熟的年龄晚些，在德国母犬配种的时间是由当地的育种协会决定的，通常在性成熟后的第2次发情时进行配种。


2 发情周期


大多数母犬的发情周期持续6—8个月，有的母犬的发情周期持续12个月也被认为是生理性的。发情周期分为发情前期、发情期、发情后期和间情期(休情期)。


从阴道内开始排出血液至接受交配的时间为发情前期，持续7-13天。母犬接受交配的时间为发情期，持续时间为3-21天，平均为9天左右。


一般将黄体功能期视为发情后期。大多数母犬在发情后期的2(1—5)天内仍然接受交配。发情后期的持续时间为9-12周，到这时黄体己完全溶解。但许多作者把发情后期并不定义为至黄体溶解时，而是至子宫内分泌活动完全停止时，此期持续时间为18-20周。发情后期至发情前期出现的一段时间为间情期，间情期内母犬虽然没有发情表现，但检查发现，在间情期内卵巢内有3-4次的卵泡发育及退化过程，血液中也有轻度的雌激素水平升高，此期持续1-3个月，最终进入发情前期。


卵泡发育期大约为10一12天，这期间雌激素水平不断升高。雌激素通过血液循环到达靶器官，造成阴门、阴道、子宫和输卵管的水肿及增生过程。黏膜上的血流量增多，子宫黏膜的血细胞渗出进入子宫腔并与子宫的分泌物相混合。卵泡期的末期可在血液中测到最高浓度的17β雌二醇含量。伴随着卵泡中雌激素合成的开始减少，在血液中出现由垂体前叶分泌的LH峰值，同时促卵泡素(FSH)也释放(FSH分泌的调节机制在犬的发情周期中尚不能被完全解释清楚)。LH峰值的出现与卵泡颗粒细胞黄体化的形成同时出现。大多数母犬在这个时候开始接受交配。LH峰值出现后的2天发生排卵。所排出的卵子2-3天后具有受精能力，伴随着排卵过程开始形成黄体并不断加强孕酮的产量。在孕酮的作用下，生殖道黏膜的肿胀情况开始减退，子宫血管壁开始变厚，进入子宫内分泌期。


表1 母犬发情各期的时间及主要特点


母大发情周期里激素的变化情况见图1(略)。


3 最佳配种时间的确定方法


若能在母犬的排卵时间予以配种的话，则能收到最佳的妊娠效果。但遗憾的是到现在为止在临床实践中尚未找到一种非常可靠的确定母犬排卵时间的方法。不过用几种方法进行综合判定常能取得较好的效果。间接确定母犬排卵时间的方法可通过观察母犬阴道黏膜的颜色的变化。阴道细胞学检查法及测孕酮的方法。若有好的B超诊断仪，亦可通过B超的方法观察母犬卵巢的排卯时间。值得提出的是单靠某一种方法尚不能肯定说出母犬的确切的排卵时间。见表2略。


从表1可以看出，若仅以发情前期、发情期的表现去推断母犬的排卵时间是很难确定的，因其变动范围很大。通过测阴道上皮的角质化亦不甚理想。而观察阴道黏膜细胞的浮冰样堆积及测孕酮量显得相对接近。但孕酮水平的开始升高，也有较难把握之处。因此，若想较难确的测定母犬的排卵时间，需要采取综合判定的方法。


4 发僧检查


4.1 阴道检查 明道检查法对于确定母犬的发情具有一定的说服力。此法一般在站立保定下进行，需要大小适度的犬用开腔器及专用的光源。


首先用软纸将阴门周围擦干净，然后用左手的大拇指和食指把阴门口轻轻的翻开，以保证开腔器的前端直接与阴道黏膜接触。右手持已消毒完好的、与体温接近的、浇上一些生理盐水以保证润滑的开腔器缓缓的插入阴道。起初开腔器的方向朝上，然后水平向前推。达到一定深度后，在专用光源的帮助下，观察阴道黏膜颜色及分泌物等。


检查结果与判定：判定母犬发情期的不同时期主要根据阴道黏膜的颜色变化、教膜的肿胀情况及分泌物的多少。判定标难见表3略。


雌激素的增多是以上变化的主要原因。如阴道黏膜的水肿、增生及角质化等。在间情期阴道黏膜上皮只有2-3层，故黏膜上血管明显，呈玫瑰红。而在发情期，由于雌激素的作用，阴道黏膜上皮达到15-20层，故阴道黏膜颜色变白及形成特有的浮冰样堆积。


4.2 阴道细胞学检查 阴道上皮的组织学构建受雌激素的影响很大。在间情期阴道黏膜由2-3层非角质化的扁平上反覆盖。在雌激素的影响下细胞层增生且表层细胞角质化，最大程度的细胞增生可以达到20层。角质化的过程发生在发情期。从发情后期开始阴道上皮逐渐退化。阴道细胞学检查的目的即在此基础上达到认识发情周期的时间、确定排卯时间及了解卵巢功能状况等。


阴道细胞学检查可在做阴道检查的同时用无菌的棉拭子在阴道深处轻轻擦拭一下以采得阴道黏膜上皮(阴道前庭处的阴道黏膜上皮受雌激素的影响不大，故要在阴道深处采样)，然后在载玻片上轻轻的滚一下。用帕帕尼科方法染色。但此法比较复杂，需要较多时间。目前德国汉诺威兽医大学繁殖医学院使用的是一种工厂化生产的专用染色剂，染色时非常方便，且效果非常好但其详细成分不清。阴道黏膜上皮亦可用姬姆萨方法染色、阴道细胞染色的判定标难主要是根据细胞的大小、形状、细胞核与细胞浆成分的比例及核内物质的存在与否。见表4略。


在间情期看到的是基底细胞或副基底细胞为主，这些细胞在发情前期消失，形成中间细胞和浅层细胞。除上皮细胞之外，在发情前期还有大量的红细胞渗出并能观察到少量的白细胞。


在发情前期向发情过渡时，浅层细胞增多，且逐渐的角质化。在接近排卵时看到的几乎都是角质化的表层细胞(80％-90％)，这些细胞单个的平位于载玻片上。检验证明，大约75％的母犬在最大角质化程度后的第1天发生排卵。最大角质化程度持续1-6天，平均2.6天。


在发情期的后期表层角质层细胞几天之内逐渐脱落，阴道细胞抹片的角质化细胞相互连接。在这个再生过程中阴道黏膜层也出现了白细胞，在发情后期的2-4天内阴道抹片上可见到大量的白细胞，同时重新出现深层细胞。


在发情后期的早期做阴道细胞抹片间或可见到泡沫细胞(空泡细胞)及发情后期细胞(限制性基底细胞，其细胞浆中含有中性粒细胞)。后一种细胞为发情后期的典型特征。但在阴道炎时也有类似的现象。个别母犬在阴道黏膜的再生过程中常伴有大量炎性细胞的产生，引起脓性细胞的排出，此点要与子宫疾病区别开来。发情周期中阴道细胞抹片不同细胞的分布情况，见表5略。


4.3 孕围测定 到目前为止确定母犬排卵时间的范围最可靠的方法是测定孕酮。因为孕酮在发情前期即将结束时开始升高，一般在达到5ng/ml时即可排卵。临床实践中通常这样处理：母犬动情之后(开始进入了发情前期)可每2天进行一次阴道黏膜及阴道细胞学检查，只要阴道细胞角质化达到了50％，即可采血进行孕酮测定孕围量达到4-5ng/ml时，即可对母犬配种。发情周期中孕酮浓度的变化，见表6略。


4.4 B超 B型超声诊断技术亦可用于母犬的排卵鉴定。但对B超仪器的质量要求及操作人员的技术要求均很高，在德国这种方法已经作为一种排卵时间确定的重要辅助手段。

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