自家组织灭活苗的制作方法

bluewing2003

自家组织灭活苗的制作方法

材料:症状典型动物的淋巴结,肺,脾，肝脏等病原含量较多的组织。
药品:分析纯甲醛、青链霉素、0.9％生理盐水。
器皿：小型组织捣碎机一台、手术刀、量筒、盆、漏斗、2000毫升量杯、手术剪、解剖刀、5升的窄口瓶，纱布。
制作过程：
1、采集病料。无菌采集症状典型的病猪的淋巴结,肺,脾肝脏等组织。
2、分离细菌：挑取病变比较明显的部位分离细菌，细菌的分离按照常规的细菌分离方法分离。
3、捣碎病料：把采集或者送检的病料近可能的剪碎，越碎越好。按照重量比加入灭菌的生理盐水（1：3）在组织捣碎机里面捣碎组织。
4、过滤：将上步制成的物分三次过滤，第一次用一层沙布过滤，第二次用 两层沙布过滤，第三次用四层沙布过滤。（第一次的滤渣丢弃，滤液待用），之后用加入滤液总体积的0.8％的甲醛。放入37℃温箱放置2－3d,期间每镉三小时摇晃一次。
5、细菌的扩大培养：根据实际情况，挑选分离的细菌扩大培养。当浑浊度足够时加入总体积的0.8％的甲醛灭活，灭活2－3天。
6、活菌检测：为了检测培养物是否灭活彻底，吸取50微升到相应的平板上，37℃温箱放置1天，观测是否有细菌生长。
7、分装自家苗：把细菌培养物与组织滤液混合，在加入一定量的灭菌生理盐水，配制到一定浊度，分装。
8、自家苗的安全检测：抽取0.5ML，1ML自家苗，腹腔注射昆明小白鼠，观测2d.在观测期间小鼠没有任何不适的症状出现，说明，制作的疫苗可以安全下线。
使用方法：
1、先用自家苗注射一两窝小猪，观察两天，看有没发生过敏、或注部位发生炎。如果没有上述反应说明自家苗制作成功。
2、使用量：母猪产前4 周注射4毫升/头；乳猪:7-9日龄肌注1ML,15-18日龄注射2毫升； 小猪（30-35日龄）：3毫升/头。

zhuxiugao

呵呵，好东西，要学习一下。不知道楼主是从哪儿弄得？